歯肉線維芽細胞におけるコラーゲン貪食の機序と炎症性サイトカインによる制御の解明

本年度は歯周病原性細菌由来Lipopolydaccharide(LPS.がヒト歯肉線維芽細胞(HGF)におけるコラーゲンの細胞への付着と貪食に及ぼす作用とその機序の検討を行ったところ、以下に示す結果が得られた。(1)Actinbacillus actinomycetemcomitans LPSはHGFにおけるAktのリン酸化およびcollagen-coated beadsの細胞への付着とその後の貪食を有意に促進した。(2)これらのLPSの促進作用は可溶型CD14(sCD14)あるいはLPS binding protein(LBP)の存在下で促進された。(3)PI3K阻害薬はLPSとLBPの同時刺激が促進するAktのリン酸化およびco11agen-coatedbeadsの細胞への付着とその後の貪食を部分的に抑制した。(4)LPSとLBPの同時刺激は細胞のアクチン細胞骨格を変化させる(多くのストレスファイバーの消失ならびに、核周囲と細胞膜直下におけるアクチンフィラメントの集積)が、PI3K阻害薬はこれを抑制した。したがって、歯周病原性細菌由来LPSはコラーゲンの歯肉線維芽細胞への付着やその後の貪食を促進することにより、歯肉組織におけるコラーゲン代謝を傷害し、また血清中のsCD 14やLBPはこれを促進的に制御していると考えられる。また、PI3K/AktはLPS/LBPがアクチン細胞骨格の再構成に依存して促進するコラーゲンの貪食過程に部分的に関与している可能性がある。

本年度は歯周病原性細菌由来Lipopolydaccharide(LPS.がヒト歯肉線維芽細胞(HGF)におけるコラーゲンの細胞への付着と貪食に及ぼす作用とその機序の検討を行ったところ、以下に示す結果が得られた。(1)Actinbacillus actinomycetemcomitans LPSはHGFにおけるAktのリン酸化およびcollagen-coated beadsの細胞への付着とその後の貪食を有意に促進した。(2)これらのLPSの促進作用は可溶型CD14(sCD14)あるいはLPS binding protein(LBP)の存在下で促進された。(3)PI3K阻害薬はLPSとLBPの同時刺激が促進するAktのリン酸化およびco11agen-coatedbeadsの細胞への付着とその後の貪食を部分的に抑制した。(4)LPSとLBPの同時刺激は細胞のアクチン細胞骨格を変化させる(多くのストレスファイバーの消失ならびに、核周囲と細胞膜直下におけるアクチンフィラメントの集積)が、PI3K阻害薬はこれを抑制した。したがって、歯周病原性細菌由来LPSはコラーゲンの歯肉線維芽細胞への付着やその後の貪食を促進することにより、歯肉組織におけるコラーゲン代謝を傷害し、また血清中のsCD 14やLBPはこれを促進的に制御していると考えられる。また、PI3K/AktはLPS/LBPがアクチン細胞骨格の再構成に依存して促進するコラーゲンの貪食過程に部分的に関与している可能性がある。