植物ホルモン分泌性根圏微生物における有用菌株選抜法の開発

植物激素分泌根际微生物有用菌株选择方法的开发

• 批准号: 18880035
• 负责人: 小林 創平
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: National Agriculture and Food Research Organization
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18880035/
• 关键词: アゾスピリラム属; オーキシン生産; シュードモナス属; DNA; フィンガープリンティング法; アゾスピリラム; 窒素固定; 植物ホルモン; SNP; PCR; PCR-RFLP

1、北農研内の小麦植物体から、キングB培地の蛍光色素を基準にして蛍光性シュードモナス様菌を、RC培地を使ってアゾスピリラム様菌を単離して、オーキシン生産量を調査した結果、その値は菌株間で大きく異なるとともに、分離源り(地域等)や分離法によっても変動した。特に、RC培地ポジティブ菌株の生産量は、他の菌株のそれより高かった。2、シュードモナス属とアゾスピリラム属細菌のオーキシン関連遺伝子、及び、アゾスピリラムの窒素固定関連遺伝子の塩基配列情報に基づいて、多数のPCRプライマーを設計して、既知のリファレンス菌株に適用した結果、一部のPCRプライマーは当該遺伝子を増幅させた。3、収集した菌株やリファレンス菌株のDNAをボイル法にて抽出し、設計したPCRプライマーで当該遺伝子を増幅した結果、その増幅によりアゾスピリラム属菌株を識別できるとともに、DNAバンドの泳動距離からA.brasilenceとlipoferumをも区別することが可能であった。4、設計したPCRプライマーを用いて、当該遺伝子を増幅し、制限酵素処理により一塩基多型を解析した結果、A.brasilenceとlipoferumを区別できるPCR-RFLP法を開発できた。5、開発したDNAフィンガープリンティング法により、十勝菌株のほとんどがA.brasilenceであること、生物研の菌株にはlipoferumが多数含まれること、RC培地ポジティブや蛍光性の菌株の多くは、アゾスピリラム属でないこと、が推測された。ただし、DNAフィンガープリント法の結果とオーキシン生産量などの生理形質の相関関係は明確でなかった。

1, north NongYan の wheat plant か ら, キ ン グ B the petty の 蛍 photopigment を benchmark に し て 蛍 optical シ ュ ー ド モ ナ ス others in bacteria を, RC petty を make っ て ア ゾ ス ピ リ ラ ム others in bacteria を 単 from し て, オ ー キ シ ン production を survey し た results, そ の numerical は strains between で big き く different な る と と も に, separating source り (regional) や separation に よ っ Youdaoplaceholder0 て changes た. The <s:1> production volume <e:1> of the special に and RC petite ポジティブ strains, and the それよ <s:1> high った of the other <s:1> strains. 2, シ ュ ー ド モ ナ ス genus と ア ゾ ス ピ リ ラ ム belong to bacterial の オ ー キ シ ン masato even heritage 伝, and び, ア ゾ ス ピ リ ラ ム の smothering element fixed masato even heritage 伝 son の salt base with column intelligence に base づ い て, most の PCR プ ラ イ マ ー を design し て, both known の リ フ ァ レ ン ス strains に applicable し た results, a の PCR プ ラ イ マ ー は when the 伝 を son Increase range させた. 3, 収 set し た strains や リ フ ァ レ ン ス strains の DNA を ボ イ ル method に て spare し, design し た PCR プ ラ イ マ ー で when the posthumous son 伝 を rights of し た results, そ の rights of に よ り ア ゾ ス ピ リ ラ ム belong to strain を recognition で き る と と も に, DNA バ ン ド の swimming distance か ら a. rasilence と lipoferu The difference between mを する and とが may be であった. 4, design し た PCR プ ラ イ マ ー を with い て, when the legacy limitations 伝 を raised し picture, enzyme 処 Richard に よ り type a salt Quito を parsing し た results, a. rasilence と lipoferum を difference で き る PCR - RFLP method を open 発 で き た. 5, open 発 し た DNA フ ィ ン ガ ー プ リ ン テ ィ ン グ method に よ り, 10 strains の ほ と ん ど が a. rasilence で あ る こ と, biological research の strains に は lipoferum が contains most ま れ る こ と, RC petty ポ ジ テ ィ ブ や 蛍 optical の strains の more く は, ア ゾ ス ピ リ ラ ム genus で な い こ と, が さ Youdaoplaceholder0. た だ し, DNA フ ィ ン ガ ー プ リ ン ト method の results と オ ー キ シ ン production な ど の physiological character の phase masato masato is は clear で な か っ た.