植物ホルモン分泌性根圏微生物における有用菌株選抜法の開発

植物激素分泌根际微生物有用菌株选择方法的开发

• 批准号: 18880035
• 负责人: 小林 創平
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: National Agriculture and Food Research Organization
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18880035/
• 关键词: アゾスピリラム属; オーキシン生産; シュードモナス属; DNA; フィンガープリンティング法; アゾスピリラム; 窒素固定; 植物ホルモン; SNP; PCR; PCR-RFLP

1、北農研内の小麦植物体から、キングB培地の蛍光色素を基準にして蛍光性シュードモナス様菌を、RC培地を使ってアゾスピリラム様菌を単離して、オーキシン生産量を調査した結果、その値は菌株間で大きく異なるとともに、分離源り(地域等)や分離法によっても変動した。特に、RC培地ポジティブ菌株の生産量は、他の菌株のそれより高かった。2、シュードモナス属とアゾスピリラム属細菌のオーキシン関連遺伝子、及び、アゾスピリラムの窒素固定関連遺伝子の塩基配列情報に基づいて、多数のPCRプライマーを設計して、既知のリファレンス菌株に適用した結果、一部のPCRプライマーは当該遺伝子を増幅させた。3、収集した菌株やリファレンス菌株のDNAをボイル法にて抽出し、設計したPCRプライマーで当該遺伝子を増幅した結果、その増幅によりアゾスピリラム属菌株を識別できるとともに、DNAバンドの泳動距離からA.brasilenceとlipoferumをも区別することが可能であった。4、設計したPCRプライマーを用いて、当該遺伝子を増幅し、制限酵素処理により一塩基多型を解析した結果、A.brasilenceとlipoferumを区別できるPCR-RFLP法を開発できた。5、開発したDNAフィンガープリンティング法により、十勝菌株のほとんどがA.brasilenceであること、生物研の菌株にはlipoferumが多数含まれること、RC培地ポジティブや蛍光性の菌株の多くは、アゾスピリラム属でないこと、が推測された。ただし、DNAフィンガープリント法の結果とオーキシン生産量などの生理形質の相関関係は明確でなかった。

1. In the research area of Beijing, the light pigments of wheat plants were isolated, the light pigments were measured on the basis of photoperiod, and the bacteria were isolated and isolated by RC culture. The results of the experiments, the results of the experiments, the results of the laboratory tests, the source test and the source test (regional, etc.) were used. Special and RC strains were isolated from the ground, while the other strains were isolated from other strains. 2. In the case of bacteria, bacteria, asphyxium, asphyxia, asphyxiate, asphyxiate, most PCR strains, the results of the tests, the results of the tests of the strains that are known to be used, and the results of one of the tests of the strains of strains that are known to be infected, the results of the tests, and the results of a PCR test that is used as a template, are included in this paper. 3. Use the method of DNA testing to extract and design the results of the PCR test. The results show that the strain is different from each other, and that the swimming distance of the DNA strain is different from that of the A.brasilence strain. 4. Design and analyze the results of PCR analysis, analyze the results of enzyme restriction analysis, analyze the results of PCR-RFLP analysis, and compare the results of PCR-RFLP analysis. 5. Most of the strains in the biological research industry contain DNA, RC, RC, and so on. The results show that most of the strains are sensitive and sensitive, and most of the strains of biological research are not sensitive to biological research. 5. The results of this method were compared with each other. The results showed that there was a clear correlation between the physiology and physiology of each other.