細胞ダイニン軽鎖Tctex-1によるGタンパク質共役型受容体制御機構の解明

细胞动力蛋白轻链 Tctex-1 阐明 G 蛋白偶联受体调节机制

• 批准号: 18890015
• 负责人: 斎藤 将樹
• 金额: $ 1.68万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18890015/
• 关键词: 副甲状腺ホルモン受容体; 受容体カルボキシル末端; カルボキシル末端会合タンパ質; Tctex-1; MVP; extracellular signal-regulated kinase 1; 2; 細胞内局在変化; Gタンパク質共役型受容体; GPCR-C末端; C末端会合タンパク質; シグナル伝達調節; トロンポキサンA_2受容体

副甲状腺ホルモン(PTH)は血中Ca^<2+>濃度の制御に関わっており、骨リモデリングを促すことから骨粗鬆症治療薬として注目を集めている。我々は以前、PTH受容体のカルボキシル末端に会合するタンパク質として細胞質ダイニン軽鎖の一種であるt-complex tesds expressed-l(Tctex-l)を見出し、Tctex-lがPTH受容体の細胞内内在化に関与することを示した。そこで本研究では,Tctex-lのPTH受容体シグナル伝達に対する影響を詳細に検討した。Tctex-l会合タンパク質は、酵母ツーハイブリッド系を用いて探索した。Tctex-lとMVPとの細胞内結合は、免疫沈降法により検討した。細胞表面PTH受容体量は細胞表面ビオチン化法にて、また、extracellular signal-regulated kinase1/2(ERK1/2)のリン酸化は、Western blottingにてそれぞれ検討した。酵母ツーハイブリッド系の結果、Tctex-l結合タンパク質としてmajor vault protein(MVP)を見出した。さらに、Tctex-lはMVPと細胞内で会合し、その会合には特にMVPのcoiled-coil domainが関与することが示された。野生型PTH受容体(PTHR-WT)発現細胞では、PTH刺激によるERK1/2リン酸化はMVPの過剰発現によって抑制されたが,Tctex-1との会合を欠損したPTH受容体変異体(PTHR-KRVS)発現細胞では抑制されなかった。また、どちらの細胞においてもEGF誘導性ERK1/2リン酸化はMVP過剰発現によって抑制されなかった。以上のことから、PTH受容体のシグナル伝達は、Tctex-lがMVPと複合体を形成することによって抑制される可能性が示唆された。

Parathyroid parathyroid disease (PTH), parathyroid thyroid gland, parathyroid thyroid gland and parathyroid thyroid gland (PTH). Before we did this, the PTH acceptor was rendezvous at the end of the cell, the cell was activated, the t-complex tesds expressed-l (Tctex-l) was detected, and the intracellular internalization of the Tctex-l PTH receptor was shown. In the course of this study, Tctex-l PTH recipients have reached the level of tolerance in this study. Tctex-l rendezvous and explore the system of yeast and yeast. Tctex-l MVP immunoprecipitation assay and intracellular binding assay were used. Cell surface PTH receptive volume, cell surface capacitance, cell surface chemistry, extracellular signal-regulated kinase1/2 (ERK1/2) acidification, Western blotting surface acidification, cell surface volume, cell surface volume, cell surface Yeast was used to analyze the results, and Tctex-l combined with major vault protein (MVP) was used to obtain the results. Tctex-l MVP intracellular rendezvous, coiled-coil domain rendezvous, MVP rendezvous, and rendezvous. Wild-type PTH receptor (PTHR-WT) showed cytopathic activity, PTH-stimulated ERK1/2 acidified MVP showed significant inhibition of MVP, and Tctex-1 rendezvous showed cellular inhibition of PTH receptor (PTHR-KRVS). After EGF treatment, acidification of MVP has a negative effect on the inhibition of respiratory failure. The formation of the complex of PTH receptor, Tctex-l receptor and Tctex-l receptor indicates the possibility of inhibition.

项目成果

細胞膜裏打ちタンパク質4.1Gの副甲状腺ホルモン受容体シグナル伝達に対する作用

细胞膜衬里蛋白4.1G对甲状旁腺激素受体信号传导的影响

• 发表时间: 2007
• 作者: Masaya Iwashita;Nobuaki Oka;Satoko Ohkubo;Masaki Saito;Norimichi Nakahata;中畑 則道;Masaya Iwashita;Masaki Saito;斎藤 将樹;Masaki Saito;斎藤 将樹
• 通讯作者: 斎藤 将樹

Neurotrophic factor production in human astrocytoma cells by 2,5,6-tribromogramine via actibvation of epsilon isoform of protein kinase C

2,5,6-三溴麦碱通过激活蛋白激酶 C 的ε亚型在人星形细胞瘤细胞中产生神经营养因子

• 发表时间: 2006
• 期刊: European Journal of Pharmaceutical Science 28(4)
• 作者: Masaya Iwashita;Nobuaki Oka;Satoko Ohkubo;Masaki Saito;Norimichi Nakahata;中畑 則道;Masaya Iwashita;Masaki Saito
• 通讯作者: Masaki Saito

Inhibitory Effect of Ethanol Extract of Piper Longum L. on Rabbit Platelet Aggregation through Antagonizing a Thromboxane A_2 Receptor

荜茇乙醇提取物拮抗血栓素A_2受体对家兔血小板聚集的抑制作用

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biological and Pharmaceutical Bulletin 30
• 作者: Masaya Iwashita;Masaki Saito;Yasunaga Yamaguchi;Ryoji Tatagaki and Norimichi Nakahata
• 通讯作者: Ryoji Tatagaki and Norimichi Nakahata

Elucidation of Regulatory Mechanisms of Parathyroid Hormone Receptormediated ERK1/2 Phosphorylation by Major Vault Protein.

阐明主要穹窿蛋白介导的甲状旁腺激素受体介导的 ERK1/2 磷酸化的调节机制。

• 发表时间: 2007
• 作者: Fukui;M.;Nakagawa;T.;Minami;M.;Satoh;M.;Kaneko;S;Saito M
• 通讯作者: Saito M

Type l angiotensin receptor(AT1-R)一mediated decrrease in type 2 angiotensin receptor mRNA level is denpendent on G and extracelluar signal-regulaterd kinase 1/2 in AT1-R-transfected PC12 cells

在 AT1-R 转染的 PC12 细胞中，l 型血管紧张素受体 (AT1-R) 介导的 2 型血管紧张素受体 mRNA 水平降低依赖于 G 和细胞外信号调节激酶 1/2

• 发表时间: 2008
• 期刊: Journal of Neuroendocrinology 20
• 作者: Masaki Saito;Yuki Shinohara;Hitomi Sasaki;Yuki Netsu;Makoto Yoshida and Norimichi Nakahata
• 通讯作者: Makoto Yoshida and Norimichi Nakahata