連鎖球菌が持つCD59指向性コレステロール依存性細胞溶解毒素の作用機構

CD59导向的链球菌胆固醇依赖性溶细胞毒素的作用机制

• 批准号: 18890127
• 负责人: 田端 厚之
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18890127/
• 关键词: 連鎖球菌; コレステロール依存性細胞溶解毒素; ILY; Sm-hPAF; huCD59; コレステロール; 作用特性

コレステロール依存性細胞溶解毒素(CDC)に属しながらヒト型CD59(huCD59)指向性を示すインターメディリシン(ILY)及びStreptococcus mitis-derived human platelet aggregation factor(Sm-hPAF)の作用機構解明を目的とし、特に毒素分子側の要因に関する検討を行った。CDCの細胞傷害活性にはドメイン4に存在する11merアミノ酸が寄与していると考えられていることから、Sm-hPAFの11merアミノ酸を厳密なhuCD59指向性を示すILYの対応アミノ酸と交換した変異体(Sm-hPAF/ILY11)を作製した。この変異体の作用特性について、正常生体細胞系(赤血球)及び培養細胞系で評価した。その結果、各動物由来の赤血球に対する溶血活性では、Sm-hPAF/ILY11はSm-hPAFと比較してヒト赤血球指向性が向上する傾向が確認された。また培養細胞系では、huCD59非発現型のU-937 DE-4においてSm-hPAF/ILY11に対する感受性がSm-hPAFよりも低下する傾向が確認された。しかしながら、上記の各特性変化はILYには及ばなかった。以上より、ILYの厳密なhuCD59指向性はllmerアミノ酸のみに規定されているのではなく、11merアミノ酸領域以外もしくはllmerアミノ酸領域を含んだ広範な領域で規定されていることが示唆された。なお、現時点ではSm-hPAFの結晶構造は明らかではないため、今後検討を進めるにはSm-hPAFの立体構造情報が必要である。また、今年度行う予定であったモデル膜系での検討については、huCD59の精製が予想以上に困難で精製方法の確立には至らなかったために実施できなかった。現在、huCD59の精製を効率化するためにタグを付加したhuCD59変異体発現系を構築中である。

To investigate the mechanism of action of the CD59 (huCD59) and Streptococcus mitis-derived human platelet aggregation factor(Sm-hPAF) in order to elucidate the molecular mechanism of CD59 (huCD59). CD59 directivity shows that ILY has the ability to control the 11-mer acid exchange (Sm-hPAF/ILY11). The characteristics of allogeneic action were evaluated in normal living cell lines (erythrocytes) and cultured cell lines. The hemolytic activity of erythrocytes derived from each animal was confirmed by comparing Sm-hPAF/ILY11 with Sm-hPAF. The tendency of Sm-hPAF/ILY11 to decrease the sensitivity of cultured cell lines such as U-937DE-4 and huCD59 was confirmed. All the characteristics of the book are changed. The above mentioned, ILY's dense huCD59 directivity is not available in the acid domain, but in the acid domain. Sm-hPAF crystal structure information is necessary for future discussion. This year, the film system is scheduled to be examined and refined. The purification method of huCD59 is difficult to establish. Now, huCD59's refining efficiency is increasing, and huCD59's heterogeneous development system is being constructed.

项目成果

Streptococcus intermediusが分泌する細胞溶解毒素インターメディリシンが関与するヒト細胞特異的な感染現象

涉及中间链球菌分泌的溶细胞毒素 intermedicin 的人类细胞特异性感染现象

• 发表时间: 2007
• 作者: 佐藤 恭子;星野 倫範;齋藤 幹;西口 美由季;小西 郁理;近藤 好夫;藤原 卓;田端 厚之;田端 厚之;田端 厚之
• 通讯作者: 田端 厚之

宿主細胞膜構造がStreptococcus intermediusのヒト細胞感染に及ぼす影響

宿主细胞膜结构对中间链球菌感染人体细胞的影响

• 发表时间: 2008
• 作者: Hori K;et. al.;Chieko Mitaka;田端 厚之
• 通讯作者: 田端 厚之

細菌感染反応場としてのヒト型CD59:ヒト細胞指向性コレステロール依存性細胞溶解毒素の受容体及びStreptococcus intermedius感染の宿主側トリガー因子としての役割

人类CD59作为细菌感染的反应位点：作为人类亲细胞胆固醇依赖性溶细胞毒素的受体和中间链球菌感染的宿主触发因子

• 发表时间: 2007
• 作者: Atsushi;Tabata;et. al.;中村史朗 等;田端 厚之
• 通讯作者: 田端 厚之