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抗生物質に対して病原性原虫や卵菌遊走子が示す形態生理的ストレス応答研究

致病原虫和卵菌游动孢子对抗生素形态生理应激反应的研究

基本信息

批准号：
06F06226
负责人：
鍋田憲助
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

形態変化を伴う真核生物病原体、特に卵菌について、ローダミン-ファロイジン蛍光染色によって刺激応答系に連動するF-アクチン分子の定性・定量的解析を試みた。物理的刺激でAphanomycescochlioides遊走子から生じた被のう胞子状の休眠細胞は、時間の経過と共に再度遊走子の再生を観察することができる。この胞子状細胞の形成時にF-アクチン重合を阻害する抗生物質として知られるlatrunculin Bを極低濃度(0.1〜0.02μgm1^<-1>)で曝露させておき、同様に遊走子への再生を見たところ、0.02μgmrl^<-1>という極低濃度で処理した場合でも休眠胞子からの遊走子再生は50%近く抑制され、0.1μgml^<-1>ではほとんどゼロであった。繊維状のアクチンフィラメントは遊走子の状態ではほとんど観察されず、F-アクチン分子が完全な脱重合体で存在することが示された。一方、遊走子が被のう化する過程でアクチンプラークと呼ばれる球状のアクチン集合体が細胞膜内膜に沿うように、ほぼ等間隔で出現した。この構造体のかご状の配置から、アクチンプラークは細胞の形を造り上げる細胞骨格形成に重要な役割を担うことが示唆された。物理的刺激により被のう胞子状態になった細胞が再度遊走子に再生する過程では、繊維状のアクチンフィラメント集合体が急激に出現し、被のう化した殻から細胞本体が抜け出るための駆動力になっていると理解された。類似の現象が菌糸の先端ならびに二次分岐の開始部位にも認められた。アクチン分子は、遊走子あるいは胞子発芽時の非栄養増殖ステージではその絶対量は常に一定で、既存の蛋白分子を使い廻していると結論した。これらの重要な結果は、2報の海外学術雑誌に投稿、掲載され、現在、もう一報Phytopathology誌に投稿したものが審査中である。

Morphological changes associated with eukaryotic pathogens, specific oomycetes, and light staining are associated with qualitative and quantitative analysis of F-protein molecules. Physical stimulation of Aphanomycetes cochliodes leads to the formation of sporophytic dormant cells, and the passage of time leads to the formation of new cells. When the sporozoites were formed, the F-7 receptor was inhibited by antibiotics and latrunculin B was detected at very low concentrations (0.1 ~ 0.02μ gml ^ ). When the sporozoites were formed, the sporozoites were <-1>inhibited <-1>by 50% at very low concentrations (0.02 μ gml ^)<-1>. The state of the molecule is not observed, and the F-molecule is completely dissociated. A spherical aggregate of particles appears at equal intervals along the inner membrane of the cell. The structure of this structure is very important for the formation of cell skeleton. Physical stimulation is the process by which cells re-migrate and regenerate, and the process by which dimensional aggregates are rapidly stimulated, transformed and the dynamics of the cells themselves are understood. Similar phenomena occur at the beginning of the second bifurcation. The results show that the amount of non-nutrient growth in the development of spores is constant, and the amount of existing protein molecules is constant. The important results were published in the overseas academic journals of two newspapers, published in the journal of Phytopathology, and reviewed in the journal of Phytopathology.