t(1;3)(p36;q21)白血病に関与するMEL1融合遺伝子の機能解析

t(1;3)(p36;q21)転座を持つ骨髄異形性症候群や急性骨髄性白血病では、3q21.3に位置するRPN1遺伝子のプロモーターによってPRドメインが欠落したMEL1遺伝子(MEL1S)が過剰発現を起こし、これが本白血病の白血化に密接に関わっている分子病態であると報告されている。私達は、以前にt(1;3)転座を持つ3症例の1p36切断点の分析を行い、MEL1遺伝子のイントロン1に切断点をもつ症例を見だし、MEL1遺伝子には融合遺伝子が存在しうるという可能性を示した。最近、さらに2症例を追加して解析したところ、1症例はMEL1遺伝子のイントロン1に切断点をもつ症例であった。そこで、これらの合計5症例について、1p36切断点と3q21切断点の解析を行ったところ、1p36切断点は3箇所への切断点集中が見られたが、3q21切断点はRP11-475N22に集中することが判った。また、MEL1遺伝子の融合遺伝子を単離すべく、3'RACEや5'RACEを行ったところ、MEL1遺伝子のイントロン1に切断点をもつ2症例を含む4症例において、合計10個のMEL1融合mRNAを単離することに成功した。驚いたことに、(1)こうしたMEL1隔合mRNAはMEL1遺伝子の5'側に切断点をもつ症例でも検出された、(2)融合相手遺伝子の存在部位は全て3q21以外であった、ことから、これらの融合遺伝子形成に関与している機構は染色体転座機構ではない、別の機構であることが考えられた。4症例に共通して認められたMEL1/HOXA9融合について、その存在をゲノムレベルで証明すべく、MEL1/HOXA9融合検出用のinverse PCRを行ったが、検出できなかった。そこで、これらの融合mRNAはゲノムレベルではなく、転写段階で起こっていると考えられる。また、MEL1/HOXA9融合遺伝子について、その機能を解析すべく、constructを作成して、BaF3細胞に遺伝子導入したところ、顆粒球分化抑制作用はないことが判明した。現在のところ、MEL1融合mRNAの病態における役割は不明である。また、3症例について、MEL1S mRNA量を定量測定したところ、2症例では過剰発現、1症例では正常骨髄と変わらない量であった。以上の結果から、MEL1Sの過剰発現は全例に認められる訳ではなく、分子病態はもっと、複雑であることが示唆された。

t(1;3)(p36;q21)転座を持つ骨髄異形性症候群や急性骨髄性白血病では、3q21.3に位置するRPN1遺伝子のプロモーターによってPRドメインが欠落したMEL1遺伝子(MEL1S)が過剰発現を起こし、これが本白血病の白血化に密接に関わっている分子病態であると報告されている。私達は、以前にt(1;3)転座を持つ3症例の1p36切断点の分析を行い、MEL1遺伝子のイントロン1に切断点をもつ症例を見だし、MEL1遺伝子には融合遺伝子が存在しうるという可能性を示した。最近、さらに2症例を追加して解析したところ、1症例はMEL1遺伝子のイントロン1に切断点をもつ症例であった。そこで、これらの合計5症例について、1p36切断点と3q21切断点の解析を行ったところ、1p36切断点は3箇所への切断点集中が見られたが、3q21切断点はRP11-475N22に集中することが判った。また、MEL1遺伝子の融合遺伝子を単離すべく、3'RACEや5'RACEを行ったところ、MEL1遺伝子のイントロン1に切断点をもつ2症例を含む4症例において、合計10個のMEL1融合mRNAを単離することに成功した。驚いたことに、(1)こうしたMEL1隔合mRNAはMEL1遺伝子の5'側に切断点をもつ症例でも検出された、(2)融合相手遺伝子の存在部位は全て3q21以外であった、ことから、これらの融合遺伝子形成に関与している機構は染色体転座機構ではない、別の機構であることが考えられた。4症例に共通して認められたMEL1/HOXA9融合について、その存在をゲノムレベルで証明すべく、MEL1/HOXA9融合検出用のinverse PCRを行ったが、検出できなかった。そこで、これらの融合mRNAはゲノムレベルではなく、転写段階で起こっていると考えられる。また、MEL1/HOXA9融合遺伝子について、その機能を解析すべく、constructを作成して、BaF3細胞に遺伝子導入したところ、顆粒球分化抑制作用はないことが判明した。現在のところ、MEL1融合mRNAの病態における役割は不明である。また、3症例について、MEL1S mRNA量を定量測定したところ、2症例では過剰発現、1症例では正常骨髄と変わらない量であった。以上の結果から、MEL1Sの過剰発現は全例に認められる訳ではなく、分子病態はもっと、複雑であることが示唆された。