間葉系幹細胞由来ヒト肝細胞の機能解析とその応用的利用法の検討

人间充质干细胞来源肝细胞的功能分析及其应用方法研究

• 批准号: 06J00488
• 负责人: 山本 雄介
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Waseda University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J00488/
• 关键词: 脂肪細胞由来間葉系幹細胞; 肝細胞; 移植実験; 増殖因子; サイトカイン; 肝障害; 間葉系幹細胞; 肝細胞分化; マイクロアレイ; シグナルパスウェイ; 肝機能; クラスターリング解析; 分化転換; 間質上皮転換; シトクロームP450; 老化

脂肪組織由来間葉系幹細胞に増殖因子群を添加することで機能的な肝細胞を得ることに成功した。これまでに、その細胞を四塩化炭素によって肝障害を与えたマウスに移植することで、肝機能の改善が確認された。その際に、実験のコントロールとして使用した未分化な間葉系幹細胞にもアンモニア濃度やGOT・GPTなどの肝障害マーカーの低下といった肝障害・機能の改善効果が確認された。つまり、未分化な脂肪組織由来間葉系幹細胞が肝機能改善に関わる因子を分泌しており、それによって肝機能が改善したと考えられた。そこで、サイトカインアレイを用いて、脂肪組織由来間葉系幹細胞が分泌している因子の同定を試みた。その結果、繊維芽細胞や骨髄組織由来の間葉系幹細胞と比較してIL-1Ralpha,IL-6,IL-8,G-CSF,GM-CSF,MCP-1,NGF,HGFなどのサイトカインや増殖因子の分泌量が多いことが示された。これらの因子は抗炎症作用や肝細胞増殖に関わるものであり、これらによって未分化な間葉系幹細胞を移植した際の肝機能の改善が誘導されることを示した。また、FGF4などの因子で間葉系幹細胞を前処理し、中胚葉系の幹細胞を内胚葉系の細胞へと誘導することで、肝細胞誘導の期間を短縮させた。これによって従来、肝細胞誘導に約5週間かかったところを13日間まで削減することに成功した。この方法を用いて得られた肝細胞は従来の手法によって得られた細胞と同等の機能を有していることを示した。未分化幹細胞の肝機能改善効果の確認や肝細胞分化期間の短縮法の確立によって、脂肪組織由来間葉系幹細胞の肝障害治療へ応用への可能性が示された。

Subcutaneous fat derived mesenchymal stem cell proliferation factor group added to the liver cells The liver function was improved after transplantation. In addition, the use of undifferentiated mesenchymal stem cells in the treatment of liver dysfunction was confirmed. Undifferentiated subcutaneous fat derived mesenchymal stem cells secrete factors related to liver function improvement Subcutaneous fat is derived from mesenchymal stem cells and secreted by mesenchymal stem cells The results showed that the secretion of IL-1Ralpha,IL-6,IL-8,G-CSF,GM-CSF,MCP-1,NGF,HGF and other growth factors in mesenchymal stem cells derived from embryonic stem cells and bone marrow tissues increased significantly. These factors are related to the anti-inflammatory effect of hepatocyte proliferation and the induction of liver function improvement during transplantation of undifferentiated mesenchymal stem cells. FGF4 is a factor that shortens the induction period of mesenchymal stem cells, mesoembryonic stem cells, and endoembryonic stem cells. The liver cells were successfully induced in about 5 weeks. The method is to obtain the liver cells from the liver. Confirmation of liver function improvement effects of undifferentiated stem cells, establishment of shortening method during hepatocyte differentiation, and potential use of subcutaneous adipose-derived mesenchymal stem cells for liver dysfunction therapy were demonstrated.

项目成果

"Stem cells into liver"--Basic research and potential clinical applications.

“干细胞进入肝脏”——基础研究和潜在的临床应用。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Adv.Exp.Med.Biol. 585
• 作者: Banas A;et. al.;アグネス バナス;山本雄介;アグネス バナス
• 通讯作者: アグネス バナス

再生医療における肝再生の現状-幹細胞からの肝細胞への分子誘導と肝障害治療への展望

再生医学中肝再生的现状——从干细胞到肝细胞的分子引导及肝损伤治疗的前景

• 发表时间: 2006
• 期刊: 化学と生物 10
• 作者: Banas A;et. al.;アグネス バナス;山本雄介;アグネス バナス;山本雄介;寺谷 工
• 通讯作者: 寺谷 工

A comparative analysis of transcriptome and signal pathway in hepatic differentiation of human adipose mesenchymal stem cells.

人脂肪间充质干细胞肝分化转录组及信号通路的比较分析

• 发表时间: 2008
• 期刊: FEBS Journal 275
• 作者: Yamamoto Y;et. al.
• 通讯作者: et. al.

バイオ人工肝臓の新しい細胞ソースとしてのステム細胞の評価

干细胞作为生物人工肝新细胞来源的评价

• 发表时间: 2006
• 期刊: 再生医療 Vol.5 No.2
• 作者: Banas A;et. al.;アグネス バナス;山本雄介;アグネス バナス;山本雄介
• 通讯作者: 山本雄介

Plasticity of adult stem cells into liver. Current Research in Hepatology.

成体干细胞进入肝脏的可塑性。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Current Research in Hepatology (印刷中)
• 作者: Banas A;et. al.;アグネス バナス;山本雄介
• 通讯作者: 山本雄介