すい臓がんにおけるヘッジホッグシグナル伝達系を標的とした天然物由来抗がん薬の創製

开发针对胰腺癌刺猬信号系统的天然产物抗癌药物

• 批准号: 06J02046
• 负责人: 細谷 孝博
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J02046/
• 关键词: ソニックヘッジホッグ; GLI1; 天然物; スクリーニング; アッセイ法; 転写活性; フィザリン

最近の研究で,胚発生において重要な役割をしているヘッジホックシグナル(Hh)伝達経路が,種々の癌細胞で異常亢進し,腫瘍の発生や拡大に寄与しているとの報告がされた.これら癌細胞では,Hhシグナル伝達経路を遮断することが有効な治療法の一つとして考えられており,本研究では,Hhシグナルの最下流に位置する転写因子GLIによる転写活性を阻害する化合物を,天然資源より得,新たなタイプのHh阻害剤を提案することにした.まず,目的にあったアッセイ系を,細胞を用いたレポーターアッセイを基本にして構築した.ヒト正常皮膚細胞(HaCaT細胞)に標的である転写因子GLI1を過剰に発現させ,GLI binding siteを有するレポータープラスミドでその転写活性を,ルシフェリン/ルシフェラーゼ反応による発光量で測定するシステムである.構築したアッセイ系において,スクリーニングの最適条件を検討し,スクリーニングのプロトコルを作成した.作成したスクリーニングシステムにて,研究室保有の天然物ライブラリーをスクリーニングしたところ,zerumbone (1), zerumbone epoxide (2), staurosporinone (3), 6-hydroxystaurosporinone (4), arcyriaflavin C (5), 5,6-dihydroxyarcyriaflavin A (6)を同定した.また,天然資源(植物,放線菌,生薬等)をスクリーニングした結果,Physalis minimaのメタノール抽出物にGLI1転写阻害活性を見出し,P. minimaよりphysalin F(7)およびB(8)を活性化合物として単離した.構築したアッセイ系で同定した化合物の中で,1,3,7および8について,Hhシグナル伝達経路の異常亢進が原因で増殖が認められている膵臓癌細胞株(PANC1)およびヒト前立腺癌細胞株(DU145)におけるHhシグナルに関与する遺伝子発現を確認した.その結果,構築したアッセイ系で同定した化合物は,PANC1およびDU145細胞に対して,細胞毒性を示し,これら細胞株で,Hhシグナルに関与する遺伝子(Ptch, Bc12等)の発現を抑制することが判明し,天然資源よりGLI転写阻害活性化合物の同定に成功した.

Recent studies have shown that embryonic development is an important part of the process, and that cancer cells are abnormally hyperactive. In this study, we proposed a new approach to the inhibition of Hh activity by Hh factor GLI at the downstream position of Hh cells. The goal is to create a system of cells that can be used to create a system of cells that can be used to create cells. In normal skin cells (HaCaT cells), the expression of GLI1 was detected, and the binding site of GLI was determined by the amount of GLI activity. The optimal conditions for constructing the system are discussed, and the optimal conditions for constructing the system are discussed. The natural substances in the laboratory were identified as zerumbone (1), zerumbone epoxide (2), staurosporinone (3), 6-hydroxyDaurosporinone (4), arcyriaflavin C (5), 5,6-dihydroxyarcyriaflavin A (6). Natural resources (plants, actinomycetes, biochemicals, etc.) are the most active compounds in the world. As a result, GLI1 is the most active compound in P. minima. Among them, 1, 3, 7 and 8 compounds of the same type were constructed and the abnormal hyperactivity of Hh in the cell pathway was identified as the cause of proliferation in the cancer cell line (PANC1) and in the adenocarcinoma cell line (DU145). As a result, the construction of a series of identical compounds showed cytotoxicity against PANC1 and DU145 cells, and the inhibition of the development of genes (Ptch, Bc12, etc.) related to this cell line was identified. Natural resources were used to successfully identify compounds with inhibitory activity.

项目成果

Tryptophan 4‐Aminocinnamamides from a Myxomycete Fuligo aurea.

来自粘菌类 Fuligo aurea 的色氨酸 4-氨基肉桂酰胺。

• DOI: 10.1002/chin.200719170
• 发表时间: 2007
• 期刊: ChemInform
• 作者: T. Hosoya;Yui Kato;Yukinori Yamamoto;M. Hayashi;K. Komiyama;M. Ishibashi
• 通讯作者: M. Ishibashi

ヘッジホッグシグナル伝達経路を標的とした天然物の探索(2):Ziziphuscambodianaの成分

寻找针对hedgehog信号通路的天然产物（2）：枣子成分

• 发表时间: 2008
• 作者: 金子謙一;田中憲光;高橋応明;伊藤公一;T. Morimoto;M.-G. Kang;Y. Yoon;T.Morimoto;T.Morimoto;T.Morimoto;Carlo R.da Cunha;T. Morimoto;Takahiro Hosoya;T.Hosoya;Takahiro Hosoya;細谷孝博;舘野史
• 通讯作者: 舘野史

ヘッジホッグシグナル伝達経路を阻害する天然物の探索

寻找抑制刺猬信号通路的天然产物

• 发表时间: 2007
• 作者: 金子謙一;田中憲光;高橋応明;伊藤公一;T. Morimoto;M.-G. Kang;Y. Yoon;T.Morimoto;T.Morimoto;T.Morimoto;Carlo R.da Cunha;T. Morimoto;Takahiro Hosoya;T.Hosoya;Takahiro Hosoya;細谷孝博;舘野史;佐藤未奈;Takahiro Hosoya;細谷孝博
• 通讯作者: 細谷孝博

ヘッジホッグシグナル伝達経路を標的とした天然物の探索(1): Physalisminima等の成分

寻找针对hedgehog信号通路的天然产物（一）：Physalisminima等成分。

• 发表时间: 2008
• 作者: 金子謙一;田中憲光;高橋応明;伊藤公一;T. Morimoto;M.-G. Kang;Y. Yoon;T.Morimoto;T.Morimoto;T.Morimoto;Carlo R.da Cunha;T. Morimoto;Takahiro Hosoya;T.Hosoya;Takahiro Hosoya;細谷孝博
• 通讯作者: 細谷孝博

タンデム型マイケルーアルドール反応を用いるクロモン及びフラボノイド誘導体の効率的合成法の開発

串联迈克尔醛醇反应开发色酮和类黄酮衍生物的高效合成方法

• 发表时间: 2007
• 作者: 金子謙一;田中憲光;高橋応明;伊藤公一;T. Morimoto;M.-G. Kang;Y. Yoon;T.Morimoto;T.Morimoto;T.Morimoto;Carlo R.da Cunha;T. Morimoto;Takahiro Hosoya;T.Hosoya;Takahiro Hosoya;細谷孝博;舘野史;佐藤未奈
• 通讯作者: 佐藤未奈