微生物酵素と化学合成を組み合わせたウイルス感染阻害剤の創製とその応用

微生物酶与化学合成相结合的病毒感染抑制剂的研制及应用

• 批准号: 06J02997
• 负责人: 森本 舞子 (梅村 舞子)
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J02997/
• 关键词: 微生物酵素; インフルエンザウイルス; 感染阻害剤; 多価効果; sialyltransferase

微生物Mucor hiemalisより単離された酵素endo-β-N-acetylglucosaminidaseの糖転移活性を利用して創製された、新規なインフルエンザウイルス捕捉型感染阻害剤CDOキトサンの機能解析を進めた。本阻害剤はインフルエンザウイルスのタンパク質であるヘマグルチニンに特異的に認識されるα2,6シアリルラクトサミンを含有する複合糖鎖をキトサンポリマーに複数付加したものであり、昨年度中にその高い阻害効果が確認されている。本年度は、本阻害剤のバックボーンであるキトサンの長さおよびシアロ糖鎖の付加率(DS)が感染阻害効果に与える影響を正確に見積もるため、5種類の長さの異なるキトサンを用いて、各々に対してDS値の異なる同阻害剤を作成し、その感染阻害効果をみた。DS値はNMR分析により同定した。結果、キトサンの長さはウイルス直径の2〜3倍以上である必要のあることが明らかとなった。またDS値が15%以上になると、効果はプラトーに達し一定の値をとった。DS値が15%のとき、キトサンバックポーンに付加されたシアロ糖鎖問の距離は平均しておよそ4nmとなる。一方、ヘマグルチニンは三量体であるが、その各々のシアル酸結合ポケット間の距離もまたおよそ4nmである。したがって、DS値が15%以上になると効果が一定となるのは、ヘマグルチニンの構造と一致したリーズナブルな結果であるといえる。すなわち本阻害剤は、シアル酸とヘマグルチニンの相互作用を介してインフルエンザウイルスに接着し、さらに余剰部分がキトサンの比較的剛直な性質ゆえにウイルスの周辺に棒状に伸びることによって、ウイルスの細胞への接近が阻害されていると考えられる。この考察は、分子動力学計算等を用いて作成したCDOキトサンとヘマグルチニンの分子モデルからも裏付けられた。

Microbial Mucor hiemalis よ り 単 from さ れ た enzyme endo - beta - N - acetylglucosaminidase の move sugar planning activity を using し て created さ れ た, new rules な イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス capture type resistance against infection tonic CDO キ ト サ ン の function analytical を into め た. The resistance against tonic は イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス の タ ン パ ク qualitative で あ る ヘ マ グ ル チ ニ ン に specific に know さ れ る alpha 2, 6 シ ア リ ル ラ ク ト サ ミ ン を contains す る complex sugars locked を キ ト サ ン ポ リ マ ー に plural plus し た も の で あ り, yesterday in the annual に そ の い high resistance against unseen fruit が confirm さ れ て い る. は this year, the resistance against tonic の バ ッ ク ボ ー ン で あ る キ ト サ ン の long さ お よ び シ ア ロ sugar lock の pay rate (DS) が infection resistance against unseen fruit に and え る influence を に see right product も る た め, long 5 kinds の さ の different な る キ ト サ ン を with い て, various 々 に し seaborne て DS numerical の different な る with resistance against tonic を し consummate, そ の infection resistance against unseen fruit を み た. DS value によ NMR analysis によ た is determined by た た. Results, キ ト サ ン の long さ は ウ イ ル ス の diameter 2 ~ 3 times more で あ る necessary の あ る こ と が Ming ら か と な っ た. The value of またDS is が15% or more になると, and the effect is プラト プラト に に to a certain <s:1> value をとった. DS numerical が 15% の と き, キ ト サ ン バ ッ ク ポ ー ン に plus さ れ た シ ア ロ sugar lock asked の average distance は し て お よ そ 4 nm と な る. One party, ヘ マ グ ル チ ニ ン は three quantity body で あ る が, そ の each 々 の シ ア ル acid combined with ポ ケ ッ の distance between ト も ま た お よ そ 4 nm で あ る. し た が っ て, more than 15% DS numerical が に な る と unseen fruit が certain と な る の は, ヘ マ グ ル チ ニ ン の structure consistent と し た リ ー ズ ナ ブ ル な results で あ る と い え る. す な わ ち this resistance against tonic は, シ ア ル acid と ヘ マ グ ル チ ニ ン の を interface interaction between し て イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス に し, then さ ら に more than turning part が キ ト サ ン の comparison of upright and outspoken nature な ゆ え に ウ イ ル ス の weeks 辺 に rod-shaped に stretch び る こ と に よ っ て, ウ イ ル ス の cells へ の near が resistance against さ れ て い る と exam え ら れ る. こ の は, molecular dynamics calculation を with い て made し た CDO キ ト サ ン と ヘ マ グ ル チ ニ ン の molecular モ デ ル か ら も in pay け ら れ た.