抗体遺伝子の発現制御とヒト型触媒抗体創製への応用

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本研究の一つ目の目的は、当研究室でこれまで明らかにしてきた軽鎖交換現象(抗体産生B細胞期において、本来発現していた軽鎖の産生がストップし、代わりに新たな軽鎖を発現する現象)における基礎的な分子機構を解明することである。また同時に、これらの軽鎖交換現象の利用による、ヒト型多機能抗体の創製およびその創製法の開発も本研究の目的である。まず、軽鎖交換現象における基礎的な分子機構の解明を目的とした研究において、現在、エピジェネティクスを介したヒト抗体軽鎖遺伝子の発現制御に関する研究を進めている。また、ヒト型多機能抗体の創製に関する研究における本年度までの研究計画は、抗原特異的抗体遺伝子を取得および触媒活性(タンパク質分解活性)付与のための抗体遺伝子を設計し、遺伝子工学的手法を用いた抗体軽鎖における特定領域と触媒の活性中心配列の組換えと、組換えにより得られた抗体遺伝子を抗体分子としてヒト細胞株で発現させるための発現ベクターの構築および動物細胞を用いたタンパク質発現であった。また、発現させた抗体タンパク質のタンパク質分解活性の有無をペプチドMCA基質を用いて測定することも本年度までの研究計画であった。実験の結果、発現ベクターの構築および動物細胞を用いたタンパク質発現を完了することができた。また、発現させた抗体タンパク質のタンパク質分解活性の有無をペプチドMCA基質を用いて測定する項目及び抗原結合性を測定する項目に関しても当初の予定通り完了することができた。現在、上記の内容に関する論文執筆及び投稿を行っている。