シャペロニン機能の1分子イメージング

伴侣蛋白功能的单分子成像

• 批准号: 06J10141
• 负责人: 飯塚 怜
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J10141/
• 关键词: シャペロニン; 構造変化; 1分子蛍光イメージング; 古細菌

バクテリア型及び真核細胞型シャペロニンが「どのようにタンパク質のフォールディングを介助しているか」を明らかにすることを目指し、下記のような研究を遂行した。1.バクテリア型シャペロニンの分子機構解析大腸菌のシャペロニンGroELが生理的条件下において、弾丸型複合体およびフットボール型複合体を同程度の割合で形成することを明らかにした。今日まで、GroELの機能は弾丸型複合体を通じて発揮されるとされてきた。今回の発見はこの定説を覆すものであり、GroELの機能発現機構モデルの改訂を迫る発見と言える。この成果はJournal of Biological Chemistry誌に掲載された。2.真核細胞型シャペロニンの分子機構解析超好熱性古細菌Thermococcus sp.strain KS-1(T.KS-1)由来シャペロニンの基質タンパク質を取り込む空洞部分の蓋構造(Helical protrusion)の開閉を(1)生化学的・構造学的に(2)1分子レベルで解析した。(1)T.KS-1シャペロニンサブユニットの連結変異体を用いた実験から、ATPにより各サブユニットで構造変化が起こった後、隣接したサブユニットのHelical protrusion間で相互作用することで空洞部分が閉じた構造へと転換することを見出した。この成果は、Journal of Biological Chemistry誌に発表した。(2)Helical protrusionの開閉を、結合させた蛍光色素の配向を検出することで可視化した。蛍光色素の配向は、励起に直線偏光を用い、その偏光を回転させ、蛍光強度の経時変化から決定した。この実験系において構造変化の観察事例を増やすことに成功し、蛍光色素の配向の差異から見積もられる角度変化は過去の研究結果と一致した。現在、この成果の論文発表の準備を進めている。

バ ク テ リ ア type and び eukaryotic cell type シ ャ ペ ロ ニ ン が "ど の よ う に タ ン パ ク qualitative の フ ォ ー ル デ ィ ン グ を mobility し て い る か" を Ming ら か に す る こ と を refers し, remember の よ う を な research carries out し た. Type 1. バ ク テ リ ア シ ャ ペ ロ ニ ン の molecular institutions coliform の シ ャ ペ ロ ニ ン GroEL が physiological conditions に お い て, 弾 pill complex お よ び フ ッ ト ボ ー ル type complex を with degree の cut close で す る こ と を Ming ら か に し た. Today, the まで and GroEL <s:1> functional projectile complexes を are in contact with じて and されるとされて た た. This time, the を statement of the <s:1> statement of the development of the system を replied that the す であ であ, and the GroEL functional development institution モデ has revised the を statement of the urgent る statement of the development と. The <s:1> results were published in the Journal of Biological Chemistry に in された. 2. The eukaryotic cell type シ ャ ペ ロ ニ ン の molecular institutions super thermophilic archaea Thermococcus sp. Strain KS - 1 (T.K S - 1) origin シ ャ ペ ロ ニ ン の matrix タ ン パ ク qualitative を take り 込 む hollow part の cover structure (Helical Youdaoplaceholder0) protrusion opening and closing を(1) biochemistry · construction に(2)1 molecule レベ で で Analysis た た. (1) T.K S - 1 シ ャ ペ ロ ニ ン サ ブ ユ ニ ッ ト の links - variant を with い た be 験 か ら, ATP に よ り each サ ブ ユ ニ ッ ト で structure - the が up こ っ た after, 隣 し た サ ブ ユ ニ ッ ト の Helical Protrusion で す interaction between る こ と で hollow part が closed じ た tectonic へ と planning in す る こ と を shows し た. The results of the に and the Journal of Biological Chemistry に are published in た. (2) Helical protrusion の open closed を, combined さ せ た 蛍 photopigment の match to を 検 out す る こ と で visualization し た. 蛍 photopigment の match to は, wound up に linear polarization を い, そ の polarization を back planning さ せ, 蛍 light intensity の 経 variations change when か ら decided し た. こ の be 験 department に お い て structure - the の 観 examine case を raised や す こ と に successful し, 蛍 photopigment の match to の differences か ら see product も ら れ る result は の past research Angle variations of consistent と し た. Now, the <s:1> <s:1> achievement <e:1> paper release form is ready to を enter めて めて る る.

项目成果

Contribution of the C-terminal region to the thermostability of the archaeal group II chaperonin from Thermococcus sp. strain KS-1

• DOI: 10.1007/s00792-006-0519-y
• 发表时间: 2006-05
• 期刊: Extremophiles
• 影响因子: 2.9
• 作者: Takao Yoshida;Taro Kanzaki;R. Iizuka;Toshihiro Komada;T. Zako;R. Suzuki;T. Maruyama;M. Yohda

超好熱性古細菌Thermococcus sp. strain KS-1由来プレフォルディンの機能解析

源自超嗜热古菌 Thermococcus sp. KS-1 菌株的前折叠蛋白的功能分析。

• 发表时间: 2008
• 作者: 米澤哲洋;菅野由利;飯塚怜;大滝証;井出直希;吉田尊雄;藤原伸介;今中忠行;養王田正文
• 通讯作者: 養王田正文

Studies on molecular mechanism of group II chaperonin from a hyperthermophilic archaeum,Thermococcus sp.KS-1

超嗜热古菌Thermococcus sp.KS-1 II族伴侣蛋白的分子机制研究

• 发表时间: 2008
• 作者: 三輪 光嗣;米谷 民明;三輪光嗣;三輪 光嗣;三輪 光嗣;三輪 光嗣;Chika Sugino;Sotaro Uemura;Tomoya Sameshima;Mihoko Suzuki;Hiroshi Kida;Taro Kanzaki;Akashi Ohtaki;Eiji Kurimoto;Akashi Ohtaki;Hitoshi Saji;Ryo Iizuka;Hiromi Horiuchi;Takao Yoshida;Takao Yoshida;Tamotsu Zako;木田宗志;Tamotsu Zako;鮫島知哉;Ryo Iizuka;Sotaro Uemura;飯塚怜;飯塚怜;飯塚怜;Masafumi Yohda;Tamotsu Zako;飯塚怜;神前太郎;米澤哲洋;Taro Kanzaki;Sotaro Uemura;Tomoya Sameshima;Yukiko Yoshinari;Tetsuya Abe;Masafumi Yohda
• 通讯作者: Masafumi Yohda

超好熱性古細菌Thermococcus sp.strain KS-1由来プレフォルディンの機能及び構造解析

超嗜热古菌Thermococcus sp.strain KS-1衍生的前折叠蛋白的功能和结构分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 三輪 光嗣;米谷 民明;三輪光嗣;三輪 光嗣;三輪 光嗣;三輪 光嗣;Chika Sugino;Sotaro Uemura;Tomoya Sameshima;Mihoko Suzuki;Hiroshi Kida;Taro Kanzaki;Akashi Ohtaki;Eiji Kurimoto;Akashi Ohtaki;Hitoshi Saji;Ryo Iizuka;Hiromi Horiuchi;Takao Yoshida;Takao Yoshida;Tamotsu Zako;木田宗志;Tamotsu Zako;鮫島知哉;Ryo Iizuka;Sotaro Uemura;飯塚怜;飯塚怜;飯塚怜;Masafumi Yohda;Tamotsu Zako;飯塚怜;神前太郎;米澤哲洋;Taro Kanzaki;Sotaro Uemura;Tomoya Sameshima;Yukiko Yoshinari;Tetsuya Abe;Masafumi Yohda;木田 宗志;飯塚 怜;鈴木 深保子;伊藤洋;Hiroshi C. Ito;鮫島 知哉;Hiroshi C.Ito and Ulf Dieckmann;増田 莉恵;伊藤洋;神前 太郎;伊藤洋;増田 莉恵;神前 太郎;伊藤 洋;菅野 由利
• 通讯作者: 菅野 由利

Prefoldin prudentially interacts with group II chaperonin in its ADP bound open conformation

前折叠蛋白在其 ADP 结合开放构象中谨慎地与 II 族伴侣蛋白相互作用

• 发表时间: 2008
• 作者: Tamotsu Zako;Yosuke Murase;Ryo Iizuka;Taro Kanzaki;Masafumi Shimizu;Masafumi Yohda and Mizuo Maeda
• 通讯作者: Masafumi Yohda and Mizuo Maeda