タマネギバエの耐寒性機構の解明-chaeroninの関与を中心に-

阐明洋葱蝇的耐冷机制 - 以毛囊素的参与为中心 -

• 批准号: 06J10873
• 负责人: 粥川 琢巳
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J10873/
• 关键词: 耐寒性; CCT; タマネギバエ; アクチン; depolymerization; Latrunculin B; 転写制御; RNAi; COT; トリパンブルー; real-time PCR

タマネギバエ(Delia antiqua)を用いてCCT(chaperonin containing the TCP-1)が耐寒性獲得に関与していることを明らかにするため以下の実験を行った.1.CCTを構成する全サブユニット(α〜θ)が,耐寒性の増加に伴い全サブユニットのmRNA発現量が同調して増加していた.2.低温処理後,CCTの基質であるアクチンの構造を蛍光観察したところ,耐寒性の低い個体ではアクチンのdepolymerizationが観察された.また、低温により生じたアクチンのdepolymerizationの後に細胞膜が損傷を受けることが観察された.3.幼虫期にアクチンの重合阻害剤であるLatruncuhnB(LatB)を摂食させた蛹を用いて耐寒性試験を行った.その結果LatBを摂食した蛹において有意に耐寒性の低下が観察された.4.耐寒性を獲得するとCCTを構成する全サブユニットが同調して増加することから、全サブユニットが同じ転写制御を受けていることが示唆された。そこで、genome workingにより全サブユニットの上流のシーケンスを明らかにした。しかし、全てのgenome workingが完了せず、エンハンサーやプロモーターの解析には至らなかった。5.RNAiによりCCTを構成するサブユニットのサイレンシングを試みた。しかし、適切な条件を見出すことができず、結果を得ることができなかった。以上の結果から,CCTの転写制御ならびにRNAiにおける証明には至らなかったが、耐寒性の高い蛹ではCCTが細胞内に多く存在するためアクチンの増強,もしくは低温によってdepolymerizationが生じても迅速にアクチンの再重合を誘発し,その結果アクチンが細胞膜を保護することで耐寒性を獲得していることが示唆された。

Youdaoplaceholder0 タ ネギバエ(Delia antiqua)を using タ てCCT(chaperonin containing the TCP - 1) が cold tolerance for に masato and し て い る こ と を Ming ら か に す る た め の below be 験 を line っ た. 1. The CCTS を constitute す る full サ ブ ユ ニ ッ ト (alpha and theta) が, cold tolerance の raised plus に companion い completely サ ブ ユ ニ ッ ト の mRNA 発 now quantity が homology し て raised plus し て い た. 2. After low temperature 処 principle, CCTS の matrix で あ る ア ク チ ン の tectonic を 蛍 light 観 examine し た と こ ろ, cold resistance low の い individual で は ア ク チ ン の depolymerization が 観 examine さ れ た. ま た, low temperature に よ り raw じ た ア ク チ ン の depolymerization の が に cell membrane damage after を by け る こ と が 観 Observe された.3. Larval stage に ア ク チ ン の reclosing resistance against tonic で あ る LatruncuhnB (LatB) を, food さ せ た pupa を with い て cold tolerance test line を っ た. そ の results LatB を, food し た pupa に お い て intentionally に cold resistance low の が 観 examine さ れ た. 4. Cold tolerance を get す る と CCTS を constitute す る full サ ブ ユ ニ ッ ト が homology し て raised plus す る こ と か ら, whole サ ブ ユ ニ ッ ト が with じ planning write suppression を by け て い る こ と が in stopping さ れ た. そ こ で, genome working に よ り full サ ブ ユ ニ ッ ト の upper の シ ー ケ ン ス を Ming ら か に し た. し か し, whole て の genome working finished が せ ず, エ ン ハ ン サ ー や プ ロ モ ー タ ー の parsing に は to ら な か っ た. 5.RNAiによ <s:1> CCTを constitutes するサブユニット <s:1> サ レ レ シ グを グを グを みた みた みた. を し か し, appropriate な conditions show the す こ と が で き ず, results を る こ と が で き な か っ た. の above results か ら, CCTS の planning write suppression な ら び に RNAi に お け る prove に は to ら な か っ た が, cold resistance, high の い pupa で は CCTS が intracellular に す more く る た め ア ク チ ン の raised strong, も し く は cryogenic に よ っ て depolymerization が raw じ て も quickly に ア ク チ ン の overlap again を 発 lure し, そ の results ア ク チ ン が を protect cell membranes す る こ と で cold tolerance を get し て い る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

タマネギバエの低温に対するhomeoviscous adaptation

洋葱蝇对低温的顺粘性适应

• 发表时间: 2008
• 作者: Kayukawa T;Chen B;Hoshizaki S;lshikawa Y;粥川 琢巳
• 通讯作者: 粥川 琢巳

Expression of Δ9-acyl-CoA desaturase mRNA is upregulated in Delia antiqua pupae with enhanced cold hardiness

抗寒能力增强的 Delia 古蛹中 Δ9-酰基辅酶 A 去饱和酶 mRNA 的表达上调

• 发表时间: 2008
• 期刊: Insect Biochemistry and Molecular Biology 37
• 作者: Kayukawa T;Chen B;Hoshizaki S;lshikawa Y
• 通讯作者: lshikawa Y