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単細胞緑藻クラミドモナスのRNAi突然変異体解析による関連遺伝子の同定と機能解析

单细胞绿藻衣藻RNAi突变分析相关基因的鉴定及功能分析

基本信息

批准号：
06J11864
负责人：
山崎朋人
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kochi University of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

ゲノム上の塩基配列の変化を伴わない生物の形質変化はエピジェネティクスと呼ばれ、近年盛んに研究が行われている。現在までにエピジェネティクスにはDNAのメチル化、ヒストンタンパクの修飾やsmall RNAが関与する事がわかっている。我々は単細胞緑藻クラミドモナスを用いてリピート配列に起こった転写抑制機構の突然変異体を作出し、その機構の解明を目指した。まずどのような転写抑制機構がリピート配列に働いているのかを調べたところ、リピート配列にはDNAのメチル化と、ヒストンタンパクのメチル化が起こっており、細胞をヒストンの脱アセチル化阻害剤に細胞をさらす事で解除される事からも、この転写抑制はクロマチンの構造変化を伴ったものである事がわかった。特にDNAのメチル化はCpG配列中のCにのみ起こっており、ヒストンタンパクへ修飾は、転写抑制された領域においてN末端から4、9、36番目のリジンにモノメチル化が起こっていた。次にDAN断片をゲノム上にランダムに挿入する事で転写抑制が解除される突然変異体を作出し、破壊された遺伝子から転写抑制に関与する分子を想定し、転写抑制機構の解明を試みた。転写抑制の突然変異体からは、ヒストンタンパクのメチル化活性をもつSETドメインがコードされた遺伝子が破壊された物や、転写伸長反応に関与するskp1/elongin C遺伝子が破壊された物が存在した。現在はこれら遺伝子が確かに関与するかを確かめており、次の段階において破壊された遺伝子産物が含まれるタンパク複合体を精製し、どのような具体的機能が予測されるか、どのような活性を持っているかを調べていく予定である.

In recent years, there has been a lot of research in recent years, and there have been many studies in recent years. Now, I don't know what to do. I don't know. Now, I don't know, DNA, I don't know, I don't know what to do. We use the computer system to assign the device to the writing suppression mechanism to make a sudden response, and to explain the target indicator. No, no, no. I'm sorry to know that I'm sorry, but I don't know what to do. In the special CpG configuration, there are some problems in the configuration of DNA, such as, write suppression, domain, N-terminal, and so on. On the sub-DAN fragment display, the write suppression is released, the writing inhibition is released, the writing inhibition is detected, the writing inhibition is determined, and the writing inhibition mechanism is used to explain the writing inhibition. The write suppresses the abrupt change of the body, the activity of the SET, the growth of the material, the length of the device, and the skp1/elongin C component. Now, you need to make sure that you have a problem with each other, and that the sub-system contains the exact information of the complex, the specific mechanism and the activity of the system.