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単細胞緑藻クラミドモナスのRNAi突然変異体解析による関連遺伝子の同定と機能解析

单细胞绿藻衣藻RNAi突变分析相关基因的鉴定及功能分析

基本信息

批准号：
06J11864
负责人：
山崎朋人
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kochi University of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

ゲノム上の塩基配列の変化を伴わない生物の形質変化はエピジェネティクスと呼ばれ、近年盛んに研究が行われている。現在までにエピジェネティクスにはDNAのメチル化、ヒストンタンパクの修飾やsmall RNAが関与する事がわかっている。我々は単細胞緑藻クラミドモナスを用いてリピート配列に起こった転写抑制機構の突然変異体を作出し、その機構の解明を目指した。まずどのような転写抑制機構がリピート配列に働いているのかを調べたところ、リピート配列にはDNAのメチル化と、ヒストンタンパクのメチル化が起こっており、細胞をヒストンの脱アセチル化阻害剤に細胞をさらす事で解除される事からも、この転写抑制はクロマチンの構造変化を伴ったものである事がわかった。特にDNAのメチル化はCpG配列中のCにのみ起こっており、ヒストンタンパクへ修飾は、転写抑制された領域においてN末端から4、9、36番目のリジンにモノメチル化が起こっていた。次にDAN断片をゲノム上にランダムに挿入する事で転写抑制が解除される突然変異体を作出し、破壊された遺伝子から転写抑制に関与する分子を想定し、転写抑制機構の解明を試みた。転写抑制の突然変異体からは、ヒストンタンパクのメチル化活性をもつSETドメインがコードされた遺伝子が破壊された物や、転写伸長反応に関与するskp1/elongin C遺伝子が破壊された物が存在した。現在はこれら遺伝子が確かに関与するかを確かめており、次の段階において破壊された遺伝子産物が含まれるタンパク複合体を精製し、どのような具体的機能が予測されるか、どのような活性を持っているかを調べていく予定である.

ゲノム上の塩组arrayの変化を合わないbioticのmorphological changeはエピジェネティクスとHUばれ, んに Research on が行われている has been popular in recent years. Now it's the DNA of DNA and the modification of DNA RNA is related to the story of the story. I am using the 々はsingle cell green algae クラミドモナスを with the いてリピート arrangement に出こった転WRITE the sudden change of the inhibitory mechanism をmade し, and the そのMechanism の Explain the purpose of the design した. The まずどのような転suppression mechanism がリピートmatching arrangement に働いているのかを动べたところ,リピート配arrayにはDNAのメチル化と、ヒストンタンパクのメチル化が出こっており、Cell をヒストンの出アセチル化 hindering 剤に Cell をさらす事でrelease される事からも、この転WRITE Suppressed はクロマチンのstructural change を合ったものである事がわかった. Special DNA のメチルCpG array in the のC にのみこっており, ヒストンタンパクへ modified は, 転Write suppressed された field においてN terminal から4, 9, and 36 items のリジンにモノメチル化が开こっていた.にDAN fragment をゲノム上にランダムにINSERT する事で転WRITING Suppression がreleaseされるSudden change をmakeし, 绊された伝子から転写综合 inhibits に关 and するmolecule をconcept し、転WRits the explanation and explanation of the inhibitory mechanism をtrial みた.転WRITING SuppressionのSudden change bodyからは、ヒストンタンパクのメチル化activationをもつSETドメインがコードされた伝子が波壊された物や、転WRits elongation and reaction 応応关与するskp1/elongin C remains. Now the はこれら伝子が正かに关 and the するかを正かめており, The second stage of the stage is broken and broken, and the product is the product of the second step.ク Complex を Refined し, どのような specific function が ESTABLISHED されるか, どのような ACTIVE を KEEP っているかを adjusted べていく ESTABLISHED である.