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磁気ピンセットを用いたF1-ATPaseのエネルギー変換機構の解明

利用磁力镊阐明F1-ATPase的能量转换机制

基本信息

批准号：
18770138
负责人：
政池知子
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Gakushuin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18770138/
关键词：
モーター蛋白回転 1分子観察

项目摘要

本研究では磁気ピンセットを用い、F_1にATPaseの中心軸Tに結合した磁気ビーズを強制的に回転させる。このとき顕微鏡下で触媒サブユニットβに結合した蛍光分子の向きの変化から構造変化を検出することにより、中心軸γの回転運動が触媒部位でのATP合成や加水分解を引き起こすメカニズムを明らかにするのが目的である。本年度は実際に磁気ピンセットを操作してF_1,-ATPaseの構造変化を観察する実験を行った。研究実施計画で述べた三つの段階について、それぞれ進展があった。第一段階の観察用フローセルについては、Ni-NTA処理ガラスではなくKOH溶液で洗浄したガラスであれば再現よく表面の汚れがない状態でサンプルの観察ができることがわかった。更に溶液組成を調節することにより、磁気ビーズがガラスに非特異的に吸着せず、中心軸γには特異的に結合するようになった。第二段階の磁気ピンセットの操作に関しては、電圧と磁場の関係が線形になるようにバイポーラー電源のgainを調節し、磁場をかけたときに磁石が熱をもつなどのトラブルを解消した。また画面合成機を活用し、磁気ピンセット操作を制御するパソコン画面をビーズ像と蛍光像とともに同時に録画することにより、磁場をかけた時間範囲が解析時に明確にわかるようにした。実際の触媒サブユニットβの構造変化の観察については、磁場をかけて中心軸γを回転させいくつかの角度で停止させたときの構造を検出した。第三段階の結果の解釈に関しては、予備的な結果から、強制回転によっても触媒サブユニットβの構造が変化することが示唆された。

The purpose of this study is to use the magnetic field to improve the performance of the magnetic device, and to combine the magnetic ATPase center with the magnetic device to strengthen the magnetic field. In the micrograph, the chemical reaction of the catalyst and the combination of the photoluminescence and the molecular photoluminescence were used to determine the temperature of the catalyst, the synthesis of ATP and the decomposition of water in the catalyst part of the catalyst. This year, we need to learn more about the operation of the international magnetic field. This year, we are looking at how to improve the operation of the international magnetic industry. The study of the implementation of the plan describes the progress of the three stages of the project. In the first section, you can see that there is a problem in the first section, that is, in the first section, the Ni-NTA solution is used to wash the KOH solution, and the surface is not visible again. The solution is made up of special absorption devices, magnetic devices, and the combination of γ-ray radiation in the center. The second stage is related to the operation of the magnetic field, the magnetic field, the gain source, the magnet, the magnet. The picture synthesis machine is used to make and control the operation of the picture synthesis machine. At the same time, the picture synthesis machine is used to make sure that the time range analysis time range of the magnetic field is clearly checked. The international catalyst is very sensitive to the production of the magnetic field. The center of the magnetic field is the center of the magnetic field. The angle of the magnetic field is very high. In the third paragraph, the results show that the results of the test, the results of the device, and the force of the catalyst are different from each other.