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マウス胚における動・静脈形成

小鼠胚胎中动脉和静脉的形成

基本信息

批准号：
18770206
负责人：
平島正則
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Kobe University (2007)Keio University (2006)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18770206/
关键词：
発生・分化細胞・組織遺伝子動物

项目摘要

マウス胚における血管形成過程を細胞レベルで解析するために、解析を行ってきた。体節に由来する細胞の系譜を検証するために、体節特異的にCreリコンビナーゼ遺伝子を発現するMoxl-Creマウスと、Cre-loxPシステムに依存してlacZレポーターを発現するRosa-floxed-lacZマウスを掛け合わせて得られる胚を解析した。血管内皮細胞マーカーとの共染色を行ったところ、心大血管流出路を形成する血管内皮細胞の一部がlacZ陽性であることが分かった。さらに、背側大動脈周囲の平滑筋細胞の多くもlacZ陽性であったが、背側大動脈・神経周囲血管叢・肢芽の内皮細胞にはlacZは検出できなかった。このことから、体節に由来する内皮細胞は低頻度にしか存在しないことが示唆された。同時にMoxl-CreマウスとFlklコンディショナル・ノックアウトマウスを掛け合わせて、血管内皮細胞の分化に必須の分子Flklを体節特異的に欠損させ、血管構築における役割を解析することを行った。血管内皮細胞への寄与が少ない結果と一致して、解析したコンディショナルノックアウトマウスにおいて、血管構造の明らかな異常は検出できなかった。また昨年度より、体節内に血管内皮前駆細胞が発生し高次血管構築に寄与する過程を観察するために、Flkl-EGFPマウス胚を用いてタイムラプス解析を試みてきた。明視野タイムラプス撮影は可能であったものの、水銀ランプ光を当てると器官発生の進行が傷害されていた。マウス胚組織を長時間培養しながら、水銀ランプ光源下でFlkl-EGFP陽性の血管内皮前駆細胞を観察するためには、さらなる条件検討が必要である。

The process of angiogenesis in the embryo is analyzed. The genealogy of segment-derived cells is verified, and segment-specific Cres are identified by Moxl-Cres, Cre-loxP, and Rosa-floxed-lacZ. The co-staining of vascular endothelial cells was positive in some parts of the vascular endothelial cells, and the outflow pathway of cardiovascular system was formed. Many lacZ positive cells in smooth muscle cells of dorsal artery, dorsal artery, peripheral vascular plexus and limb bud Endothelial cells are present at a low frequency. At the same time, Moxl-Cre Flkl is an essential molecule for vascular endothelial cell differentiation. Flkl is a segment-specific molecule for vascular architecture. The results of vascular endothelial cell growth were consistent with those of vascular endothelial cell growth. The process of vascular endothelial cell development in the body segment was observed and analyzed. Light field of vision, light field of vision, mercury field of vision It is necessary to culture embryo tissue for a long time and observe Flkl-EGFP positive vascular endothelial cells under mercury light source.