アントシアニンの発色に関わる膜輸送体のゲノムレベルでの探索

基因组水平寻找参与花青素显色的膜转运蛋白

• 批准号: 18780071
• 负责人: 中西 洋一
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18780071/
• 关键词: 植物; ゲノム; 膜輸送; アントシアニン

植物の液胞内環境を可視化する多機能な天然の指示薬として、植物に内在する色素であるアントシアニンを用いるため、アントシアニンを蓄積する植物培養細胞の検討を行った。シロイヌナズナ培養細胞T87にMYB型転写因子の一種PAP1を過剰発現させた形質転換株、ブドウ培養細胞VR株についてアントシアニンを多く蓄積する培養条件を検討した。植物膜輸送体遺伝子を、効率よく検索するため、シロイヌナズナ膜輸送体のcDNAを約800種類集積した特殊遺伝子ライブラリAmethystを作製した。Amethystの有用性を検証するため、サッカロミセス酵母で発現可能なAmethystを作製し、抽出検査で80%以上の膜蛋白質の発現を確認した。また、植物での発現用に、CaMV35Sプロモータによる遺伝子発現が可能なAmethystの作製し、これをアグロバクテリウムに導入したライブラリを作製した。植物培養細胞のアグロバクテリウムで形質転換することを試みたが、形質転換効率が低く思うように発現スクリーニングが行えなかった。一方、赤キャベツなどアントシアニンを蓄積する細胞のプロトプラスト形質転換についても試みたが、技術的に成熟していない。今後は、シロイヌナズナ植物体を評価宿主として膜輸送体スクリーニングを実施する予定である。

Plant intracellular environment を の fluid visualization す る function な more natural の instructions 薬 と し て, plant に inner す る pigment で あ る ア ン ト シ ア ニ ン を with い る た め, ア ン ト シ ア ニ ン を accumulation す る plant culture cell の 検 line for を っ た. シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ culture cell T87 に MYB type planning write factor の a PAP1 を before turning 発 now さ せ た form quality planning in plants, ブ ド ウ culture cell VR strains に つ い て ア ン ト シ ア ニ ン を く more accumulation す る culture conditions を beg し 検 た. Traces of plant membrane transport body 伝 を, sharper rate よ く 検 cable す る た め, シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ membrane transport body の cDNA を about 800 kinds of set product し た special heritage 伝 son ラ イ ブ ラ リ Amethyst を cropping し た. Amethyst の usefulness を 検 card す る た め, サ ッ カ ロ ミ セ ス yeast で 発 may now な Amethyst を do 検 pump し, more than 80% check で の membrane protein の 発 を now confirmed し た. ま た, plant で の 発 current に, CaMV35S プ ロ モ ー タ に よ る posthumous son 伝 発 が may now な Amethyst の as し, こ れ を ア グ ロ バ ク テ リ ウ ム に import し た ラ イ ブ ラ リ を cropping し た. Plant culture cell の ア グ ロ バ ク テ リ ウ ム で form quality planning in す る こ と を try み た が, form quality planning in working rate が low く think う よ う に 発 now ス ク リ ー ニ ン グ が line え な か っ た. One party, red キ ャ ベ ツ な ど ア ン ト シ ア ニ ン を accumulation す る cells の プ ロ ト プ ラ ス ト form quality planning in に つ い て も try み た が, mature technology に し て い な い. The future は, シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ を review 価 host plant body と し て membrane transport body ス ク リ ー ニ ン グ を be applied す る designated で あ る.

项目成果

Essential amino acid residues in the central transmembrane domains and loops for energy coupling of Streptomyces coelicolor A3(2)H+-pyrophosphatase.

天蓝色链霉菌 A3(2)H-焦磷酸酶能量耦合的中央跨膜结构域和环中的必需氨基酸残基。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biochimica et Biophysica Acta 1767
• 作者: Megumi Hirono;Yoichi Nakanishi;Masayoshi Maeshima
• 通讯作者: Masayoshi Maeshima

プロトン輸送性ピロホスファターゼ:低コスト化合物を利用するポンプ

质子传输焦磷酸酶：利用低成本化合物的泵

• 发表时间: 2007
• 期刊: 生化学 79
• 作者: 広野めぐみ;三村久敏;瀬上紹嗣;中西洋一;前島正義
• 通讯作者: 前島正義

植物膜輸送体の網羅的な分子機能解析による有用遺伝子の探索

通过植物膜转运蛋白的全面分子功能分析寻找有用的基因

• 发表时间: 2008
• 作者: Megumi Hirono;Yoichi Nakanishi;Masayoshi Maeshima;中西洋一
• 通讯作者: 中西洋一

Identification of amino acid residues participating in the energy coupling and proton transport of Streptomyces coelicolor A3 (2) H^+-pyrophosphatase.

鉴定参与天蓝色链霉菌A3(2)H 2 -焦磷酸酶的能量耦合和质子运输的氨基酸残基。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biochimica et Blophysica Acta-Bioenergetics 1476
• 作者: Hirono;M.
• 通讯作者: M.

Essential amino acid residues in the central transmembrane domains and loops for energy coupling of Streptomyces coelicolor A3(2) H+-pyrophosphatase

天蓝色链霉菌 A3(2) H-焦磷酸酶能量耦合的中央跨膜结构域和环中的必需氨基酸残基

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biochimica et Biophysica Acta (未定)(採択済・印刷中)
• 作者: Megumi Hirono;Yoichi Nakanishi;Masayoshi Maeshima
• 通讯作者: Masayoshi Maeshima