新たなビタミンDレセプターの高次機能の解明

阐明维生素 D 受体新的高级功能

• 批准号: 18780093
• 负责人: 山本 陽子
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18780093/
• 关键词: 栄養学; 転写制御

ビタミンD受容体遺伝子欠損(VDRKO)マウスとリガンドである1α,25(OH)_2D_3生合成の鍵酵素である1α水酸化酵素KO(1αKO)マウスの表現型は非常に良く似ており、ともに成長障害、低Ca血症、骨形成不全等が観察されるが、VDRKOマウスではこれらの表現型に加え、脱毛が観察される。よって皮膚においては1α25(OH)_2D_3非依存的なVDRの高次機能があると考えられる。そこで本研究では皮膚特異的VDRKOマウスおよび1α,25(OH)_2D_3のVDRへの結合依存的な転写促進領域(AF-2)に変異を導入したE420A/V421A/F422Aミュータント(AAA)およびΔAF2ノックインマウスを作出し解析することにより新たなVDR高次機能を明らかにしたいと考える。昨年度までに作出したAAAおよびΔAF2マウスはVDRKOマウスと同様の表現型を示したが、脱毛は観察されなかった。本年度はまず皮膚での表現型が最初に観察されるのは生後20日であることを明らかにし、マイクロアレイ解析により、VDRKOマウスと野生型の比較で発現に差のある遺伝子群からΔAF2マウスと野生型の比較でも差のある遺伝子群を差し引くことで、皮膚における1α25(OH)_2D_3非依存的なVDRの標的遺伝子のスクリーニングに成功した。さらにリアルタイムPCRにより解析した結果、同定した遺伝子の一つであるS100a8はVDRKOと皮膚特異的VDRKOでのみ発現量が増加し、AAA、ΔAF2、1αKOでは野生型と同程度の発現量であった。またこの遺伝子のプロモーター領域を用いたルシフェラーゼアッセイにより、VDRあるいはVDRΔAF2を過剰発現させると転写が抑制されることが明らかとなり、S100a8は1α25(OH)_2D_3非依存的なVDRの標的遺伝子であり、新たなVDR高次機能の一端を担っていることが強く示唆された。

ビ タ ミ ン D by let body heritage 伝 son owe loss (VDRKO) マ ウ ス と リ ガ ン ド で あ る 1 alpha, 25 (OH) _2D_3 biosynthesis の key enzyme で あ る KO 1 alpha water acidification enzyme (1 alpha KO) マ ウ ス の phenotype は very good に く like て お り, と も に handicap of growth, low Ca, bone formation is not congruent が 観 examine さ れ る が, VDRK O れら ウスで れら れら れら <s:1> phenotype に plus え, hair removal が観 check される. Youdaoplaceholder0 skin にお て て にお 1α25(OH)_2D_3 non-dependent なVDR <s:1> higher-order function があると tests えられる. そ こ で this study で は skin specific VDRKO マ ウ ス お よ び 1 alpha, 25 (OH) _2D_3 system の VDR へ の combination of interdependent な planning, promoting field (AF - 2) に - different を import し た E420A V421A/F422A ミ ュ ー タ ン ト (AAA) お よ び Δ AF2 ノ ッ ク イ ン マ ウ ス を し analytic す System る こ と に よ り new た な VDR high order function を Ming ら か に し た い と exam え る. Yesterday's annual ま で に make し た AAA お よ び Δ AF2 マ ウ ス は VDRKO マ ウ ス と with others の phenotype を shown し た が, plucking は 観 examine さ れ な か っ た. This year は ま ず skin で の phenotype が initially に 観 examine さ れ る の は postnatal 20 で あ る こ と を Ming ら か に し, マ イ ク ロ ア レ イ parsing に よ り, VDRKO マ ウ ス と wild-type の is で 発 now poor に の あ る heritage 伝 subgroup か ら Δ AF2 マ ウ ス と wild-type の is で も poor の あ る heritage 伝 subgroup を poor し lead く こ と で, skin に お Youdaoplaceholder0 1α25(OH)_2D_3 non-dependent なVDR <s:1> target 伝 sub-target ス ス リ リ ニ ニ グに グに successful た た. さ ら に リ ア ル タ イ ム PCR に よ り parsing し た results, with し た posthumous son 伝 の a つ で あ る S100a8 は VDRKO と skin specific VDRKO で の み 発 now quantity が raised し, AAA, Δ AF2, 1 alpha KO で は wild-type と with degree の 発 now quantity で あ っ た. ま た こ の posthumous son 伝 の プ ロ モ ー タ を ー field with い た ル シ フ ェ ラ ー ゼ ア ッ セ イ に よ り system, VDR あ る い system は VDR Δ AF2 を before turning 発 now さ せ る と planning write が inhibit さ れ る こ と が Ming ら か と な り, S100a8 は 1 alpha, 25 (OH) _2D_3 system of interdependent な VDR の mark heritage 伝 son で あ り, new た system な VDR One end of a higher-order machine を is responsible for って る る とが strong く prompt された.