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インビトロで形成させた人工精子レセプターを用いた受精メカニズムの解明

利用体外形成的人工精子受体阐明受精机制

基本信息

批准号：
18780210
负责人：
笹浪知宏
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Shizuoka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

家禽の卵黄膜は哺乳類の透明帯に相当する細胞外マトリクスで,受精の際に,種特異的な配偶子間の結合に重要な役割を果たしている。鳥類では卵黄膜の主要な構成タンパクであるZP1とZPCが,それぞれ肝臓と卵巣という離れた組織で合成され,卵子細胞膜上で会合し繊維を形成するという特色を持っている。本研究では,この鳥類特有の現象に着目し,人工的に精子受容体形成させる実験系を確立するとともに,これを用いて鳥類の受精を制御している仕組みを明らかにすることを目標とし,以下の成果を得た。1.ウズラの血清からZP1を精製し,これを別個体の静脈内に投与すると,卵黄膜に取り込まれ,不溶化することが判明した。この現象の普遍性を確認するために,各種家禽(ニワトリ,ホロホロ鳥,七面鳥,アヒル)からZP1遺伝子のクローニングを行うとともに,各種家禽血清からZP1を精製し,ウズラへの投与実験を行った。その結果,各種家禽ZP1をウズラに投与してもウズラと同等に卵黄膜に取り込まれることが判明し,ZP1の卵黄膜への取り込みは種を越えて起こることが分かった。2.卵黄膜を構成する微量成分としてZPAおよびZPDタンパクを同定した。遺伝子のクローニング,特異的抗体の作製を行い,発現様式を解析した。その結果,ZPAは未成熟な卵胞の顆粒層細胞に発現し,卵胞の成熟とともに発現が減少することがわかった。ZPDも卵胞の顆粒層細胞で発現するが,これは卵胞の成熟とともに発現が増加することが分かった。3.未成熟な卵胞のミクロソーム画分にZPCと特異的に相互作用する新規ZPC受容体を発見した。遺伝子のクローニングには至っていないが,このZPC受容体はZPAと同様に未成熟な卵胞に多く存在することが判明した。以上の結果から,卵黄膜の形成機構は当初予想していたよりも複雑な仕組みであることが判明し,その全貌の解明を目指した研究を遂行中である。

Poultry yolk membrane lactating transparencies are quite important for extracellular cycles, fertilization cycles, and special spousal cycles combined with important labor cycles. These yolk membranes are mainly characterized by ZP1 ZPC, the liver tissue is isolated from the egg, and the egg membrane is rendezvous on the egg membrane to form the characteristic of the egg. The purpose of this study is to focus on the characteristics of human sperm receptor. the artificial sperm receptive body formation system is used to make sure that the artificial sperm receptive body is successfully fertilized. The following results are successful. 1. The serum samples were purified by ZP1, and the yolk membranes were extracted from the yolk membrane, and the yolk membrane was not dissolved. It is common to make sure that all kinds of poultry (oysters, oysters, seven-sided oysters, birds) are tested in general, and that all kinds of poultry sera are tested for ZP1 concentration, and that all kinds of poultry sera are tested for ZP1 concentration. The results showed that the yolk membrane of all kinds of poultry ZP1 was the same as that of poultry. The yolk membrane of all kinds of poultry was detected, and the yolk membrane of ZP1 was detected. two。 The yolk membrane was divided into trace components, ZPA, ZPD, and homologue. The specific antibodies were detected and analyzed in the present way. The results showed that the oocytes of immature oocytes and mature oocytes of ZPA were less than that of mature oocytes. the results showed that the oocytes of immature oocytes and mature oocytes were not mature. ZPD oocysts, oocytes, oocytes, 3. Immature oocytes are divided into ZPC specific interactions and new ZPC recipients. The ZPC recipient ZPA has the same number of immature oocytes as the immature oocysts. According to the above results, the yolk membrane formation mechanism originally intended to replicate the diagnosis of the disease, and the full picture of the study indicated that the study was in progress.