CAPDにおける腹膜劣化抑制:抗Monocyte Chemoattractant Protein-1療法の試み

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C7/blkマウスに対して,新規遺伝子導入法として注目されている超音波マイクロバブル法による腹膜への遺伝子導入を行った。まずpCAGGS-LacZプラスミドを用いて,マイクロバブル(Optizon,Amersham社,USA)溶液とプラスミドを腹腔内にシリンジで投与し,その直後に超音波装置(Sonitron2000,Rich Mar Inc.,USA)によって腹壁から超音波照射した。3日後に腹膜採取し,β-galactosidase染色したところ,腹膜への広範囲な導入が可能であることが確認できた。次に,MCP-1のN末端側から7個のアミノ酸が欠損した変異型MCP-1で,MCP-1の受容体であるCCR2への結合能はあるが,それ以後のシグナル伝達を阻止する遺伝子;7NDを用いて,マウス腹膜への超音波マイクロバブル法による遺伝子導入を行った。導入3日目より,7NDを導入したマウスと非導入マウスの腹腔内に0.1%クロルヘキシジン(CG)2m1を4週間連続投与する方法によって腹膜硬化症を惹起した。1週毎に壁側腹膜を採取し,H-E染色,Masson-Tricrome染色にて腹膜の変化(肥厚度,線維化,浸潤細胞数など)を測定した。結果,CG投与によって,非導入群では,2週間目以降の腹膜に変化を認め,肥厚や細胞数増加を認めた。免疫染色でも非導入群では有意な線維化やマクロファージ、線維芽細胞数増加を確認できた。一方,7ND導入群は非導入群と比較して腹膜の肥厚と線維化は軽度抑制されており,浸潤細胞数も減少傾向にあった。以上の結果より,超音波マイクロバブル法による遺伝子導入は腹膜保全に有用な方法である可能性が示唆された。