CAPDにおける腹膜劣化抑制:抗Monocyte Chemoattractant Protein-1療法の試み

抑制 CAPD 腹膜恶化：抗单核细胞趋化蛋白 1 疗法的试验

• 批准号: 18790573
• 负责人: 岸本 典子
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790573/
• 关键词: 腹膜; 透析; 遺伝子導入

C7/blkマウスに対して,新規遺伝子導入法として注目されている超音波マイクロバブル法による腹膜への遺伝子導入を行った。まずpCAGGS-LacZプラスミドを用いて,マイクロバブル(Optizon,Amersham社,USA)溶液とプラスミドを腹腔内にシリンジで投与し,その直後に超音波装置(Sonitron2000,Rich Mar Inc.,USA)によって腹壁から超音波照射した。3日後に腹膜採取し,β-galactosidase染色したところ,腹膜への広範囲な導入が可能であることが確認できた。次に,MCP-1のN末端側から7個のアミノ酸が欠損した変異型MCP-1で,MCP-1の受容体であるCCR2への結合能はあるが,それ以後のシグナル伝達を阻止する遺伝子;7NDを用いて,マウス腹膜への超音波マイクロバブル法による遺伝子導入を行った。導入3日目より,7NDを導入したマウスと非導入マウスの腹腔内に0.1%クロルヘキシジン(CG)2m1を4週間連続投与する方法によって腹膜硬化症を惹起した。1週毎に壁側腹膜を採取し,H-E染色,Masson-Tricrome染色にて腹膜の変化(肥厚度,線維化,浸潤細胞数など)を測定した。結果,CG投与によって,非導入群では,2週間目以降の腹膜に変化を認め,肥厚や細胞数増加を認めた。免疫染色でも非導入群では有意な線維化やマクロファージ、線維芽細胞数増加を確認できた。一方,7ND導入群は非導入群と比較して腹膜の肥厚と線維化は軽度抑制されており,浸潤細胞数も減少傾向にあった。以上の結果より,超音波マイクロバブル法による遺伝子導入は腹膜保全に有用な方法である可能性が示唆された。

C7/blkマウスに対して,New regulations for the introduction of legacy items and attention to themいるULTRASONIC マイクロバブル法によるPERITONEAL への缝子 induct を行った.まずpCAGGS-LacZプラスミドを用いて,マイクロバブル(Optizon, Amersham Corporation, US A) The solution is administered intraperitoneally and the solution is injected directly into the abdominal cavity using an ultrasonic device (Sonitron 2000, Rich Mar Inc., USA) Ultrasonic irradiation of the abdominal wall. After 3 days, the peritoneum was collected, β-galactosidase staining was performed, and the peritoneum was introduced into the peritoneum and confirmed. Second, MCP-1's N-terminal side has 7 amino acids and is missing, and it has a different type of MCP-1, MCP-1's acceptor has a binding energy of CCR2が,それ后のシグナル伝达をstopする伝子;7NDを用いて, The マウス peritoneal ultrasound ultrasound マイクロバブル method による伝子 introduces を行った. Introduced 3rd day eye より, 7ND を introduced したマウスと non-introduced マウスの intraperitoneal 0.1% クロルヘキシジン(CG) 2m1を4 weeks of continuous administration of する method can cause peritoneal sclerosis. The peritoneum from each side of the wall was collected every 1 week, and H-E staining and Masson-Tricrome staining were used to measure the peritoneal changes (thickness, linear dimension, and number of infiltrated cells). As a result, after CG administration and non-introduction group, the peritoneum was reduced and the number of hypertrophic cells increased after 2 weeks. Immunostaining was used to confirm that the non-introduced group was intentionally wired and the number of wire-dimensional bud cells was increased. On the one hand, the comparison between the 7ND introduced group and the non-introduced group showed that peritoneal hypertrophy and linear dimensionality were suppressed, and the number of infiltrating cells tended to decrease. The above results indicate that the ultrasonic machining method and the possibility of peritoneal preservation using the ultrasonic machining method are useful.