造血器腫瘍の発生及び癌転移におけるNF-κBの機能解析とその制御

NF-κB的功能分析及其在造血肿瘤发生发展和转移中的调控作用

• 批准号: 18790672
• 负责人: 田中 宏和
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Foundation for Biomedical Research and Innovation
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790672/
• 关键词: NF-κB; 中胚葉; 造血; 血管新生; 造血器腫瘍

転写因子NF-κBの個体発生における役割については未だ不明な点が多い.本研究では、ES細胞からの中胚葉系細胞への分化過程、及び造血細胞/血管内皮細胞の発生過程におけるNF-κBの機能について解析を行った.LIF非存在下にES細胞を分化誘導した場合、培養4.5日には血球、血管内皮に共通の前駆細胞を含むFlk-1陽性細胞が約30%出現したが、ES細胞にTet-off systemを用いてdominant negative NF-κB,IκBSRを誘導した場合、活性酸素種(ROS)依存的なapoptosisが誘導され、Flk-1の発現は強く抑制されていた.抗酸化剤処理によりapoptosisを回避した場合においてもFlk-1陽性細胞の出現は認められず、LIF除去によりFlk-1プロモーターがNF-κBにより活性化されていたことから、NF-κBはES細胞から中胚葉系細胞への分化過程においてROSを介したapoptosisを抑制すると同時に、機能分子であるFlk-1の発現を転写レベルで制御していると考えられた.次にテトラプロイド凝集胚法を用いてキメラマウスを作成し、原腸形成期以降にIκBSRを誘導した場合、E7.5胚においてIκBSRを誘導しなかった場合と同様に汎中胚葉マーカーの発現が認められたが、以後の造血及び脈管形成が障害され、Ell.5胚では肉眼的に貧血を呈し、血管網の形成が強く抑制されていた.さらにE10.5胚からAGM領域の細胞を採取し、IκBSRを誘導した場合の二次造血能について検討を行った結果、コロニー形成能が著明に障害され、ROS依存的なapoptosisが誘導された.以上の結果から、NF-κBはFlk-1の他種々の遺伝子発現を介して中胚葉系細胞のapoptosisや分化を制御すること、さらにはマウス発生過程における造血及び脈管形成に重要な役割を担っていると推測された.

The individual development of NF-κB gene is unknown. In this study, we analyzed the function of NF-κ B in the differentiation process of ES cells and the development process of hematopoietic cells/vascular endothelial cells. In the absence of LIF, the differentiation of ES cells was induced, and about 30% of Flk-1 positive cells were found in the hematopoietic cells and vascular endothelial cells. IκBSR induction, ROS dependent apoptosis induction, Flk-1 production and strong inhibition. When apoptosis is avoided by anti-acidification agent treatment, Flk-1 positive cells appear, and LIF is removed, Flk-1 is activated, NF-κB is activated, and ROS is inhibited during differentiation of ES cells from mesodermal line cells, and functional molecules are inhibited. In the second stage, the embryo aggregation method was used to prepare the embryo, induce the IκBSR in the gut formation stage, induce the IκBSR in the E7.5 embryo, and recognize the development of the embryo, and then inhibit the hematopoiesis and angiogenesis. In the Ell.5 embryo, the macroscopic anemia was observed, and the formation of vascular network was strongly inhibited. In addition, E10.5 embryos were induced in AGM cells, and IκBSR was induced in secondary hematopoietic cells. These results suggest that NF-κB may play an important role in the regulation of apoptosis and differentiation in mesodermal cells, including hematopoiesis and angiogenesis.

项目成果

マウスES細胞の中胚葉分化におけるNF-κBの機能解析

NF-κB在小鼠ES细胞中胚层分化中的功能分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 田中 宏和;松村 到;江良 拓実;金倉 譲
• 通讯作者: 金倉 譲

HOX decoy peptide enhances the ex vivo expansion of human umbilical cord blood CD34+ hematopoietic stem cells/hematopoietic progenitor cells.

• DOI: 10.1634/stemcells.2006-0434
• 发表时间: 2006-06
• 期刊: Stem Cells
• 影响因子: 5.2
• 作者: A. Terunuma;V. Kapoor;C. Yee;W. Telford;M. Udey;J. Vogel