抗酸化剤は局所麻酔薬の神経毒性を軽減するか
抗氧化剂可以降低局部麻醉药的神经毒性吗?
基本信息
- 批准号:18791091
- 负责人:
- 金额:$ 2.11万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2006
- 资助国家:日本
- 起止时间:2006 至 2007
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
リドカインの神経毒性に対する重亜硫酸ナトリウムの効果を明らかにする.水棲カタツムリを用い,平成18年度と同じ方法で中枢神経を培養し実験した.1)リドカインの神経毒性に対する重亜硫酸ナトリウムの効果:単体の中枢神経細胞を条件培養液の入ったMED64ディッシュにて培養する.12〜24時間後に,倒立顕微鏡を用い,伸びた神経突起と,その先端の成長円錐を確認する.デジタルカメラで観察記録する.その後,MED64で活動電位を記録した.ディッシュ内のリドカイン濃度をそれぞれ100μM,1mM,10mM,100mMにし,30分間MED64で細胞体,神経突起,成長円錐の活動電位を記録する.その後,倒立顕微鏡を用い,各濃度の細胞体,神経突起,成長円錐を観察する.同様に重亜硫酸ナトリウム濃度を0.002,0.02,0.2,2%にし観察記録する.次に,局所麻酔薬と重亜硫酸ナトリウムの混合液を用いて実験を行い比較検討する.2)細胞内カルシウム濃度の測定:ディッシュ内に10μMの蛍光プローブFura-2AMを加え,60分間放置しwash-outする.ディッシュ内に1)で明らかになった,クロロプロカイン,リドカインが培養細胞を破壊する,あるいは電気生理学的に変化を生じた濃度を加え,細胞内カルシウム濃度の変化を測定する,重亜硫酸ナトリウムを加えることで細胞内カルシウム濃度の上昇を抑制できるか,そのときの細胞内カルシウム濃度の変化を比較する.中枢神経細胞のMED64ディッシュでの培養が難しく,細胞体と神経突起の活動電位は計測できるが,成長円錐の活動電位が計測できない.リドカイン,重亜硫酸ナトリウムとも,細胞体および神経突起に対し,濃度依存的に細胞毒性を生じる傾向にある.重亜硫酸ナトリウムによる細胞保護効果を示したデータは収集できなかった.MED64ディッシュの電極の凹凸が神経細胞の定着および成長に障害となっているため、ディッシュコーティングの更なる改良が必要である。
リドカインの神経toxicityに対する重亜sulfateナトリウムのeffectを明らかにする.水水カタツムリを用い, Heisei 18 The same method is used to cultivate the central nervous system. 1) The toxicity of the central nervous system is the same as that of the central nervous system. The effect is: single body. The CNS cells were cultured in the conditioned medium of MED64. After 12 to 24 hours, the inverted microscope was used and theびた神経 protrusion と, その apex のgrowth 円 cone をconfirmation する.デジタルカメラで観observation record する.その后, MED64 でactive potentialをRecord した.ディッシュ内のリドカイン concentration をそれぞれ100μM, 1mM, 10mM, 100mMにし, 30 minutes After recording the activity potential of MED64 cell bodies, nerve neurites, and growth cones, an inverted microscope was used to record the cell bodies and nerves at each concentration.経 protrusion, growth 熆 cone を 観 Observation and recordingする.Time, local anesthesia and sulfuric acid ナトリウムのmixed solution is used to compare the いて実験を line and 検 Discussion する.2) intracellular concentration of カルシウムDetermination of degree: 10μM Fura-2AM Fura-2AM in 10μM Fura-2AM, wash-out after 60 minutesる.ディッシュ内に1)で明らかになった,クロロプロカJapanese cultured cells Rigaku's に変化を生じたconcentration をえ, intracellular カ変化を生じたconcentration をえ, measurement of intracellular カ変化を生じたconcentration する, heavy sulfate ナトリウムを加えることで fine The increase in the concentration of intracellular fluorescein is suppressed, and the concentration of intracellular fluorescein is increased and compared. The central nervous system cells are M. ED64 is difficult to cultivate, and the activity potential of cell bodies and projections is measured, and the activity potential of growth cones is measured.きない.リドカイン, sulfate sulfate ナトリウムとも, cell body および神経 protrusion に対し, concentration-dependent にcytotoxicity を生じる tendencyにある.Heavy sulfate ナトリウムによる cell protection effect をshows したデータは collection できなかった.MED64 ディッシュの electrode The concave and convex cells are fixed and the growth is hindered.め、ディッシュコーティングのなる Improvement is necessary and である.
项目成果
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