リガンド非依存性エストロジェン受容体活性化の生理的意義に関する研究

非配体依赖性雌激素受体激活的生理意义研究

• 批准号: 18791148
• 负责人: 石田 真帆
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791148/
• 关键词: エストロジェン; ERE; エストロジェン受容体; プロラクチン; アデノウイルスベクター; ドーパミン; ブロモクリプチン; GH4ZR7; ER; ルシフェラーゼ; 下垂体前葉; Cre; loxP

ERE配列に接続したルシフェラーゼ遺伝子をアデノウイルスベクターを用いて遺伝子導入し,その発現を指標としたエストロジェンの転写活性化能が,プロラクチン細胞においてドーパミンD2受容体刺激特異的に抑制されることを確認し,そのメカニズムを検討した。パーコール密度勾配遠心分離法により得られた75%濃縮プロラクチン細胞集団において,ブロモクリプチンによりルシフェラーゼ遺伝子発現が抑制されることを確認した。またこのルシフェラーゼ遺伝子発現が,エストロジェン受容体アンタゴニストであるICI182,780投与により用量依存性に抑制された。このエストロジェンの転写活性化能は,ブロモクリプチンの内因性アゴニストであるドーパミンによっても抑制された。このブロモクリプチンの抑制作用は,ドーパミンD2受容体アンタゴニストの投与により用量依存的に回復し,ドーパミンD1受容体アゴニストを投与した場合にはブロモクリプチンの作用は再現されなかった。またこのようなエストロジェンの転写活性化能に対するドーパミンの抑制作用は,細胞株GH4ZR7では認められなかった。1,ウエスタンブロッティング法及び,Quantitative RT-PCR法により,ブロモクリプチン投与におけるエストロジェン受容体αの発現量の減少が認められなかったことから,ドーパミン刺激によるエストロジェンの転写活性化能抑制作用は,エストロジェン受容体αの発現量減少に基づくものではないことが確認された。2,フォルスコリンの投与により,ブロモクリプチンによる抑制作用は部分的に回復したが,完全には回復しなかった。またブロモクリプチンの抑制作用はPKAインヒビターの投与により再現されることは確認できず,ドーパミンの作用がcAMP抑制を介した経路をとる可能性は低いと考えられた。

ERE with column に meet 続 し た ル シ フ ェ ラ ー ゼ heritage 伝 son を ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ ー を with い て heritage 伝 import し, そ の 発 now を index と し た エ ス ト ロ ジ ェ ン の planning can write activeness が, プ ロ ラ ク チ ン cells に お い て ド ー パ ミ ン D2 に inhibition by, let the body to stimulate specific さ れ る こ と を confirm し, そ の メ カ ニ ズ ム を beg し 検 Youdaoplaceholder0. パ ー コ ー ル density hook with telecentric separation に よ り have ら れ た 75% enrichment プ ロ ラ ク チ ン cells sets 団 に お い て, ブ ロ モ ク リ プ チ ン に よ り ル シ フ ェ ラ ー ゼ heritage 伝 son 発 now が inhibit さ れ る こ と を confirm し た. ま た こ の ル シ フ ェ ラ ー ゼ heritage 伝 発 が now, son エ ス ト ロ ジ ェ ン by let body ア ン タ ゴ ニ ス ト で あ る ICI182, 780 shots and に よ り dosage dependence に inhibit さ れ た. こ の エ ス ト ロ ジ ェ ン の planning can write activeness は, ブ ロ モ ク リ プ チ ン の endogenous ア ゴ ニ ス ト で あ る ド ー パ ミ ン に よ っ て も inhibit さ れ た. こ の ブ ロ モ ク リ プ チ ン の inhibition は, ド ー パ ミ ン D2 by let body ア ン タ ゴ ニ ス ト の cast with に よ り dosage dependent に reply し, ド ー パ ミ ン D1 by let body ア ゴ ニ ス ト を cast with し た occasions に は ブ ロ モ ク リ プ チ ン の role は reappearance さ れ な か っ た. ま た こ の よ う な エ ス ト ロ ジ ェ ン の planning can write activeness に す seaborne る ド ー パ ミ ン の inhibition は, cell lines GH4ZR7 で は recognize め ら れ な か っ た. 1. Youdaoplaceholder0 ブロッティ ブロッティ グ グ method and び,Quantitative Rt-pcr method に よ り, ブ ロ モ ク リ プ チ ン cast with に お け る エ ス ト ロ ジ ェ ン by let body alpha の 発 now decrease の が recognize め ら れ な か っ た こ と か ら, ド ー パ ミ ン stimulus に よ る エ ス ト ロ ジ ェ ン の planning can write activation inhibition は, エ ス ト ロ ジ ェ ン by let body alpha の 発 now less に base づ く も の で は な い こ と が confirm さ Youdaoplaceholder0. 2, フ ォ ル ス コ リ ン の cast with に よ り, ブ ロ モ ク リ プ チ ン に よ る inhibition は part に reply し た が, completely に は reply し な か っ た. ま た ブ ロ モ ク リ プ チ ン の inhibition は PKA イ ン ヒ ビ タ ー の cast with に よ り reappearance さ れ る こ と は confirm で き ず, ド ー パ ミ ン の role が cAMP inhibit を interface し た 経 road を と る は unlikely い と exam え ら れ た.

项目成果

Estrogen actions on lactotroph proliferation are independent of a paracrine interaction with other pituitary cell types: A study using lactotroph-enriched cells

• DOI: 10.1210/en.2006-1484
• 发表时间: 2007-07-01
• 期刊: ENDOCRINOLOGY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Ishida, Maho;Takahashi, Wakaba;Arita, Jun
• 通讯作者: Arita, Jun

プロラクチン細胞においてドーパミンはエストロジェン受容体活性を抑制する

多巴胺抑制催乳素细胞中雌激素受体的活性

• 发表时间: 2008
• 作者: Maho Ishida;Jun Arita;石田 真帆
• 通讯作者: 石田 真帆

Dopamine inhibition of estrogen receptor activity in pituitary Iactotrophs

多巴胺抑制垂体催乳素雌激素受体活性

• 发表时间: 2008
• 期刊: The Journal of Physiological Scineces Vol.58 Suppl.
• 作者: Kousuke Yoshinaga;et al;Kousuke Yoshinaga;Kousuke Yoshinaga;Kousuke Yoshinaga. Vasohibin;Kousuke Yoshinaga;Maho Ishida
• 通讯作者: Maho Ishida

Adenovirus-mediated conditional luciferase reporter assay system for detection of the transcriptional activation of estrogen response element (ERE) in pituitary lactotroph cells

腺病毒介导的条件荧光素酶报告基因测定系统，用于检测垂体催乳素细胞中雌激素反应元件（ERE）的转录激活

• 发表时间: 2006
• 期刊: The Journal of Physiological Sciences Vol. 56・suppl.
• 作者: Maho Ishida;Jun Arita
• 通讯作者: Jun Arita