選択的神経再生促進における遺伝子治療の確立

建立促进选择性神经再生的基因疗法

• 批准号: 18791235
• 负责人: 藤峰 武克
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791235/
• 关键词: 過誤神経支配; PLLA tube; 神経再生; 神経栄養因子; 培養細胞; ハニカム構造; 反回神経麻庫; 末梢神経; 選択的神経誘導効果; MAPキナーゼスーパーファミリー; Aktシグナル; リン酸化酵素活性; ラット骨格筋細胞

19年度は末梢神経再生の足場となり得るPLLA tubeを用いたtube内部構造の開発を行った。併行してラットの繊維芽培養細胞を用いた研究を行った。神経の再生を促す際に、過誤神経支配を可能な限りにおいて抑制し、正しいtarget (支配筋)に神経末端が到達するために有利なtube内部構造の開発を行った。具体的にはtubeの内部をハニカム構造とした。繊維表面には細胞の接着を可能とするためのコーティングを施した。ハニカム構造は神経終末の再生と培養細胞の接着との良好な足場となった。Tube内部をゲル状に固めた細胞培養液で満たした。この中で接着型の培養細胞を継代した。この培養繊維芽細胞には、lipofection法を用いて可視化の目的であるEGFPをラベルした神経栄養因子のplasmidを導入した。ラットの反回神経切断モデルに神経を架橋するべく、このハイブリッドタイプのtubeを使用した。6週間後にtubeを含めた神経を摘出して、切片を観察したところでは、神経終末のtube内部での伸長が確認できた。従来から使用していたタイプのtubeと比較して伸長速度は有意な差をもって増加していた。問題点としては、tube周囲からの繊維芽細胞・多核巨細胞のtube内部への浸潤があり、一部に肉芽を形成していたため、神経の伸長を妨げていると考えるcaseも存在した。また解決すべき問題としては、導入した細胞が繊維上でconfluentとなった際に増殖が止まるために、つまり細胞が存在する期間が限られ、栄養因子放出も持続しないことにある。

In the 19th year, the foot field of the end of the terminal god 経 was regenerated and the PLLA tube was used. The internal structure of the tube was opened and the line was opened. Parallel research on cultured cells using sterile buds is carried out. The regeneration of the god is the limit of the possibility of the regeneration of the god, and the control of the fault of the god is the limit of the possibility of suppression, and the target is the target. (Dominator tendon) The end of the god's rib reaches the end of the tube, which is beneficial to the internal structure of the tube. The specific internal structure of the tube is the same. The surface of the 1-dimensional surface is connected to the surface of the cells. The ハニカム structure is the final regeneration of the gods and the culture of the cells is followed by the good foot field and the となった. The inside of the tube is solid and the cell culture medium is in a solid state.この中でThe contact type of cultured cells を継世した. The purpose of culturing the cells and lipofection method is to visualize the EGFP and introduce the plasmid into the cultured cells. The ラットのturns back to the gods and cuts off the モデルに神経をbridges and uses the した. After 6 weeks, the にtube contains the めた神経を, the して is removed, the slicing is performed, the したところでは, and the inner tube of the 神経final のtube is stretched and confirmed できた.従来から Use していたタイプのtubeと comparison して elongation speed は intentional な difference をもってincrease plus していた. The problem is the problem, the tube is surrounded by fibroblasts and multinucleated giant cells, and the tube is infiltrated inside the tube.していたたたたてていたため、神経のStretching を hinder げていると考えるcaseもexisting した. Solve the problem of the problem, import the cells into the cell, and multiply the confluent in the dimension.がstop the まるために, the つまりcell existence がlimit られ during the する period, and the nutrient factor release もhold続しないことにある.