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ビタミンD活性化酵素、1-水酸化酵素発現に対するレプチンの制御機構の解析

瘦素对维生素D激活酶1-羟化酶表达的调控机制分析

基本信息

批准号：
18791374
负责人：
松沼礼子
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Ohu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791374/
关键词：
レプチン 1α-水酸化酵素 Ob-Rb Ob-Ra db dbマウス leptin 24-水酸化酵素 1,25(OH)_2D_3 ob ob mice db mice

项目摘要

レプチンが腎臓の近位尿細管に特異的に存在する1α-水酸化酵素の遺伝子発現を抑制する詳細なメカニズムの解明を試みた。活性型レプチン受容体(Ob-Rb)に異常があり主要なレプチンシグナルが欠損しているdb/dbマウスを用いた実験から、レプチンの1α-水酸化酵素現抑制作用はOb-Rbを介したものであることが見出された。レプチンの腎近位尿細管細胞への直接作用を確認するために、マウス腎臓から近位尿細管細胞の初代培養を行い実験に用いた。しかし、1α-水酸化酵素の遺伝子発現はレプチンにより抑制されなかった。1α-水酸化酵素遺伝子発現は、細胞内cAMPの上昇により誘導されることが知られている。そこで、cAMPの活性化剤であるforskolinを添加して1α-水酸化酵素の発現を亢進させた状態を作りだし、レプチンの作用を調べた。しかし、レプチンは1α-水酸化酵素遺伝子発現を抑制しなかった。細胞内のcAMP量は、レプチン処理を行っても変化しなかった。この細胞におけるカルシウム代謝関連遺伝子の発現を確認した。副甲状腺ホルモン受容体(PTHR)およびVDRの遺伝子発現が認められた。また、近位尿細管細胞に特異的に発現しているメガリンおよび1α-水酸化酵素の遺伝子発現が確認された。しかし、主に遠位尿細管細胞で発現しているカルシトニン受容体遺伝子の発現量は極めて低かった。このことから、この初代細胞株は腎近位尿細管細胞主体であると考えられた。この細胞でのレプチン受容体遺伝子の発現を確認したところ、細胞内ドメインの短いOb-Raの発現は見られたが、Ob-Rbの発現は全く認められなかった。以上のことより、レプチンの1α-水酸化酵素発現抑制は、腎近位尿細管細胞への直接作用によるものではなく、他器官、組織のOb-Rbを介した二次的な作用であることが見出された。

Perforatien のレプチンが kidney proximal tubule urine に exist specific にする 1 alpha acidic enzyme の heritage 伝 son 発 now を inhibit する detailed なメカニズムの interpret を try みた. Activity type レプチン let body (Ob - Rb) abnormal にがあり main なレプチンシグナルが owe loss している db/db マウスを with いた be 験から, レプチンの 1 alpha acidic enzyme inhibition は now Ob - Rb を interface したものであることが shows された. レプチンの renal proximal tubule cells urine への direct action を confirm するために, マウス renal viscera から proximal tubule cells urine の original line cultivate をい be 験に with いた. The 伝 enzyme of the 1α -water acidification enzyme shows the inhibition of 伝レプチによによされなったったった 1α -hydroacidase 伝 offspring occur, intracellular cAMP <s:1> increase によ <s:1> induce されるとがとが know られてるるる. そこで, cAMP の activeness tonic である forskolin を add して 1 alpha acidic enzyme の発 now を hyperthyroidism させた state を as りだし, レプチンの role を adjustable べた. The 伝 of <s:1> and レプチ <s:1> 伝 1α -water acidiase progeny 伝 exhibit を inhibition of <s:1> なったったった. The amount of <s:1> cAMP within the cell を, レプチを treatment を undergoes って transformation <s:1> ななったった. The occurrence of 伝 metabolism-related legates 伝 in <s:1> <s:1> cells におけるカシウムシウムをを confirmation of <s:1> た. Parathyroid ホ, モ, モ, モ receptor (PTHR)および, VDR cultural heritage 伝, occurrence が, recognition められた. また, proximal tubule cells に urine specific に発 now しているメガリンおよび 1 alpha acidic enzyme の heritage 伝 son 発が now confirmed された. The occurrence of <s:1> in the main に distal urinary tubule cells で is <s:1> てるカるカシトニシトニシトニ the occurrence of 伝 in the <s:1> receptor cells 伝 is <s:1> extremely めて low ったったった. The main body of the first-generation cell line of <s:1> えられたとら, the primary cell line of, the renal proximal urinary tubule cells であると study えられた. この cells でのレプチン by let body heritage 伝 son の発を now confirmed したところ, intracellular ドメインの short い Ob - Ra の発は now see られたが, Ob - Rb の発はく all now recognize められなかった. Above のことより, レプチンの 1 alpha 発 acidic enzyme inhibiting は now, renal proximal tubule cells urine への direct action によるものではなく, his organs and tissue の Ob - Rb を interface した secondary role でなあることが shows された.