ミュータンス連鎖球菌のヒト樹状細胞成熟に及ぼす補体の影響

补体对变形链球菌人树突状细胞成熟的影响

• 批准号: 18791402
• 负责人: 高松 夏子
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791402/
• 关键词: 樹状細胞; ミュータンス連鎖球菌; 補体

本年度は補体不活化血清と反応させたS.mutansとヒト未成熟樹状細胞(未成熟DC)とを共培養し、樹状細胞(DC)のIL-8,IL-12産生およびCCR1,CCR7,IL-8遺伝子発現を検索した。ヒト末梢血より単核球を分離し、CD14のネガティブセレクションを行い単球を分離した。この単球のうち付着細胞を以後の実験に供した。(フローサイトメトリー解析にて95%以上のCD14陽性細胞が含まれていた。)調製した単球をGM-CSF,IL-4添加RPMI培地にて培養し、未成熟DCを誘導した。次にS.mutansMT8148をBHI培地にて培養後、煮沸し死菌化した。これらを補体不活化血清と共に反応後(S1)、未成熟DCへ刺激した。対照として、RPMI培地と共に反応したS.mutans(S2)および血清と共に反応したS.mutans(S3)を使用した。24時間後IL-8,IL-12産生量をELISAにて測定した結果、S1刺激DCはS3刺激DCに比べIL-8,IL-12産生が減少し、S2刺激時と同程度の産生量であった。また、48時間後DC上のCCR1,CCR7,IL.-8のmRNA発現量をNIHimagingにて測定した結果、CCR1発現量はS1,S2,S3刺激で差は認められなかったが、CCR7およびIL・8発現量はS3刺激DCに比べS1,S2刺激DCで少なく、さらにS1,S2刺激DCでは同程度の発現量であった。これらの結果より、血清と共培養したS.mutansがDCの成熟を促進する過程において、補体が重要な役割を果たしていることが考えられた。

This year, complement inactivation serum, anti-S. mutans and immature dendritic cells (immature DC) were co-cultured and IL-8, IL-12 production and CCR1, CCR7, IL-8 gene expression were realized. The separation of CD14 from the peripheral blood is the first step in the separation of CD14. This is the first time I've ever seen you. (More than 95% of CD14-positive cells were found in the analysis.) GM-CSF, IL-4, and RPMI were added to the culture medium to induce immature DC. S.mutansMT8148 is cultured in BHI, boiled and sterilized. Complement inactivation serum and co-reaction serum (S1), immature DC stimulation RPMI is used in conjunction with S.mutans (S2) and S.mutans (S3) After 24 hours, IL-8 and IL-12 production was measured by ELISA. The results showed that IL-8 and IL-12 production decreased when DC stimulated by S1 and S3 compared with DC stimulated by S2. The production of IL-8 and IL-12 decreased when DC stimulated by S2. CCR1, CCR7, IL. -on DC after 48 hours CCR1 mRNA expression was significantly lower in S1, S2, S3 stimulated DC than in S1, S2 stimulated DC, CCR7 mRNA expression was significantly lower in S3 stimulated DC than in S1, S2 stimulated DC, CCR7 mRNA expression was significantly lower in S1, S2 stimulated DC than in S2 stimulated DC. These results demonstrate that serum and co-culture of S. mutans play an important role in promoting DC maturation and complement plays an important role.