生体内モニタリング下でのウイルス増殖コントロールによる脳腫瘍の治療

通过体内监测控制病毒增殖治疗脑肿瘤

• 批准号: 18591580
• 负责人: 山本 信二
• 金额: $ 2.51万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18591580/
• 关键词: brain tumor; herpes simplex virus typeI; virus vector; gene therapy; glioma

1.インターフェロンがヘルペスウイルスの増殖に及ぼす影響を調べるため、各インターフェロンα、β、γの存在下(前処置+持続投与)にウイルス感染をさせ48時間培養を続けた。その結果、ウイルスの増殖ほコントロール群と比較し、インターフェロンγではほとんど抑制が認められず、インターフェロンα、βでは強力な抑制効果が得られた。この結果から、腫瘍増殖のコントロールにインターフェロンα＆βを抑制することに大きな意義があることが判明した。2.ウイルスの遺伝子には大きさの制限があり、その中に新たな遺伝子を組み込む場合、一部ウイルス固有の遺伝子を取り除きサイズを減らさなければならない。よって、単体のウイルスでは導入できる遺伝子のサイズに大きな制限ができてしまう。そこで、自己増殖可能な変異もしくは野生型ウイルスと自己複製をせず、導入遺伝子サイズが160KbのAmpliconを組み合わせて使うこととした。これにより、自由に遺伝子を導入できることとなる。これが実際可能かどうかをin vitroとマウスを用いたin vivoの実験で試したところ、自己複製可能なウイルスの増殖能力に比例してAmpliconに導入した遺伝子が発現されることが突き止められた。3.ウイルス増殖をコントロールするためには、その機構を理解することが大切である。そのひとつとして、これまでにlate promoterのphosphonoacetic acidとroscovitineによる抑制実験を行ってきた。それをさらに発展させ、具体的にどのたんぱく質がかかわっているかをウェスタンブロットなどで確認したところ、DAS binding proteinのうちKu-70とKu-80はほとんど変化が無く、DNA-PKcsが変化し、promoterの制御を行っていることを突き止めた。

1. インターフェロンがヘルペスウイルスの multiply and ぼすeffect を动べるため、each インターフェIn the presence of ロンα, β, and γ (pretreatment + continuous administration), the infection of にウイルスをさせ was cultured for 48 hours.そのRESULT, ウイルスのgrowthほコントロールgroupと comparisonし, インターフェロンγではほとんどが见められず, インターフェロンα, βではstrong な inhibiting effect られた.このRESULTSから、Swelling Proliferationのコントロールにインターフェロンα&βを suppresses the meaning of the large することに大きな and the meaning is clear した. 2.ウイルスの伝子には大きさの limit があり、その中に新たな伝子を组み込むOccasion, part of the ウイルス inherent の缝子をtake り出きサイズを minus らさなければならない.よって, 単体のウイルスでは imported できる伝子のサイズに大きな窌できてしまう.そこで、Self-propagation possibleな変differentもしくはWild-type ウイルスとSelf-reproductionをせず、Import缝子サイズが160KbのAmpliconを组み合わせて使うこととした.これにより、free に伝子を Import できることとなる. It's possible in vitro Vivo’s reproduction ability is proportional to its ability to reproduce by itself.してAmpliconにImportした伝子が発出されることが出き出められた. 3. The ウイルス multiplying をコントロールするためには, the その体をunderstanding することが大刀である.そのひとつとして, これまでにlate promoter のphosphonoacetic acid とroscovitine による inhibits 実験を行 ってきた. The specific details are as follows: DAS Binding proteinのうちKu-70とKu-80はほとんど変化が无く, DNA-PKcsが変化し, promoterのcontrolを行っていることをTUきstopめた.

项目成果

Imaging immediate-early and strict-late promoter activity during oncolytic herpes simplex virus type 1 infection and replication in tumors.

溶瘤单纯疱疹病毒 1 型感染和肿瘤复制过程中立即早期和严格晚期启动子活性的成像。

• DOI: 10.1038/sj.gt.3302831
• 发表时间: 2006
• 期刊: Gene therapy
• 影响因子: 5.1
• 作者: Yamamoto,S;Deckter,LA;Kasai,K;Chiocca,EA;Saeki,Y
• 通讯作者: Saeki,Y