胆汁酸応答分子の分子内及び分子間活性化制御機構と生理代謝調節

胆汁酸响应分子的分子内和分子间激活控制机制及生理代谢调节

• 批准号: 07F07197
• 负责人: 槇島 誠
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07F07197/
• 关键词: 核内受容体; ビタミンD受容体(VDR); レチノイド受容体(RXR); 蛍光蛋白質; 蛍光共鳴エネルギー転移(FRET); 胆汁酸; コリプレッサー; コアクチベータ; ビタミンD受容体; レチノイド受容体; 蛍光共鳴エネルギー移転; 転写因子

胆汁酸応答性核内受容体のリガンド依存性転写活性化に伴う構造変化解析を、蛍光共鳴エネルギー転移(FRET)を用いて行った。1)2分子FRET実験系の構築の為、AmCyan,ZsYellow,ECFP,EYFPの4種類の蛍光たんぱく質を用いてFRETペアの検討を行い、AmCyan/EYFPの新たな2分子FRETペアを見出した。2)AmCyan-VDRとEYFP-RXRをHEK293細胞に共発現させ、3種類のビタミンDアナログ(1,25-(OH)2D3,LCA,ADTT)によるヘテロダイマー形成能を比較検討した結果、合成ビタミンDアナログであるADTTは、添加30分においてVDR/RXRのヘテロダイマー形成を引き起こさないことがわかった。3)リガンド非存在下で、AmCyan-VDRはコリプレッサーであるEYFP-SMRTと強く結合し、リガンド添加でこれらのVDR/SMRTの結合は素早く解離される結果が得られた。SMRTのVDRからの解離において、ビタミンDアナログの構造的な違いによる違いは見られなかった。4)リガンド非存在下で、AmCyan-VDRはコアクチベータであるEYFP-SRC1と弱く結合し、1,25-(OH)2D3,合成ビタミンDアナログADTTによってこれらVDR/SRC1の結合は増加されたが次2次胆汁酸であるLCAによるVDR/SRC1の相互作用は処理30分においてその増加がほとんど見られなかった。

Bile acid responders in the nucleus are dependent on the activity of writing, concomitant with chemical analysis, and photoperiod (FRET). 1) 2-molecule FRET is used for optical transmission, AmCyan,ZsYellow,ECFP,EYFP 4 is used for photoluminescent devices, and AmCyan/EYFP for new 2-molecule FRET is used to generate data. 2) the results of the AmCyan-VDR EYFP-RXR HEK293 cells show that there is a difference between the results and the results, and the results are compared. The results show that the results are better than the results, the results show that there is a difference between the results of the results, the results of the results, the results, the results 3) if there is no such thing as a non-existent device, the AmCyan-VDR system can be used to strongly combine the EYFP-SMRT information, and add the information to the VDR/SMRT to combine the results of the previous release test with the previous results. SMRT

项目成果

Induction of SREBP-1c mRNA by Differentiation and LXR Ligand in Human Keratinocytes

• DOI: 10.1038/jid.2009.15
• 发表时间: 2009-06-01
• 期刊: JOURNAL OF INVESTIGATIVE DERMATOLOGY
• 影响因子: 6.5
• 作者: Yokoyama, Ai;Makishima, Makoto;Terui, Tadashi
• 通讯作者: Terui, Tadashi