The role of vitamin D receptor of hepatic immune cells in the pathogenesis of nonviral liver disease

肝免疫细胞维生素D受体在非病毒性肝病发病机制中的作用

• 批准号: 22K06919
• 负责人: 槇島 誠
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06919/
• 关键词: ビタミンD受容体; 肝臓; 炎症; 免疫細胞; 肝障害; 代謝

本研究課題では、研究代表者らが先行研究において見出した、ビタミンD受容体(VDR)の欠損マウスにおいて肝臓に常在するKupffer細胞や好中球などの免疫細胞の機能や肝炎の病態が変化する、という知見に基いてさらに解析を進めることで、VDRによる肝臓免疫制御メカニズムを解明する。本年度は以下の項目について検討した。１．野生型マウス及び全身性VDR欠損マウスにおいて、リポ多糖、CpG-DNA、α-ガラクトシルセラミド、コンカナバリンA（Con-A）による肝炎モデルを比較したところ、Con-A肝炎にてVDR欠損の影響が最も大きく見られることを確認した。VDR欠損によるCon-A肝炎減弱効果のメカニズム解明に焦点を絞った。２．Con-A投与6時間後に単離した肝臓免疫細胞を用いてRNAシーケンス解析を行った。Con-A投与により多数の遺伝子の発現変化を認めたが、肝炎の病態と相関するVDR欠損による影響は見られなかった。３．フローサイトメトリーを用いた免疫細胞分布の解析を行った。Con-A投与6時間及び24時間後には野生型マウスは一過性に血中トランスアミナーゼ値の増加を認めるが、全身性VDR欠損マウスでは減弱することを確認した。しかし、予想に反して免疫細胞分布に変化は認めなかった。VDR欠損マウスにおいても野生型マウスと同様に、Con-Aによる遺伝子発現変化及び免疫細胞の分布の変化が起こることから、VDR依存性の選択的な免疫細胞の機能発現が考えられた。４．VDR依存性の免疫細胞の機能発現を詳細に解析するため、Cre-LoxP系を用いたKupffer細胞、ミエロイド系細胞及び肝細胞特異的VDR欠損マウスを樹立した。以上の結果より、VDRはCon-A誘導性肝炎の病態に関与するが、選択的な免疫細胞の機能発現を介することが考えられ、詳細な解析を進めている。

This research topic was conducted by the representative of the research team who conducted the pilot study on the development and analysis of the liver immune system in response to VDR damage, which is often present in Kupffer cells, immune cell functions in the liver, and pathological changes in hepatitis. This year, the following projects were reviewed: 1. Comparing the wild-type virus with the systemic VDR deficiency virus, such as hepatitis virus, CpG-DNA, α-glucuronide, and Konkanabarin A (Con-A), it is confirmed that the impact of VDR deficiency on Con-A hepatitis is the greatest. VDR deficiency, Con-A hepatitis attenuation, and the like. 2.Con-A injection and 6 hours later, the liver immune cells were isolated and analyzed with RNA. Con-A vote and most of the genes appear to be related to hepatitis and VDR deficiency. 3. The analysis of immune cell distribution After 6 and 24 hours, the wild-type VDR increased and the systemic VDR decreased. The distribution of immune cells in the brain is different from that in the brain. VDR-dependent gene expression and distribution of VDR-dependent selected immune cells were examined. 4. VDR-dependent immune cell function is analyzed in detail. Cre-Lox P system is used in Kupffer cells, Cre-Lox P system cells and hepatocytes. The results of the above study indicate that VDR Con-A-induced hepatitis is related to the development of immune cell function.