微生物由来の特異的細胞致死タンパク質の作用機構解明と新しい細胞検出法の開発

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Bacillus thuringiensis B462株のクリスタル蛋白質をProteinase Kで処理する事によって新規な60kDa蛋白質か生成し、ヒトガン細胞HeLa細胞およびHepG2細胞に損傷活性を示すが、ヒトT細胞白血病細胞MOLT-4に対しては損傷活性を示さないことが認められた。このポリペプチドの部分アミノ酸配列に基づき、PCR法によってBacillus thuringiensis B462株のゲノムDNAから60kDa蛋白質をコードしていると考えられる二つの遺伝子を単離した。その一つは既知の遺伝子、即ちParasporin 1Aa1遺伝子であった。もう一つはParasporin 1Aa1遺伝子およびParasporin 1Ac1遺伝子と類似しているが配列の異なる新しい遺伝子であることが判明した。この遺伝子を暫定的にParasporin 1Ac2遺伝子と呼ぶことにした。Parasporin 1Aaは、HepG2、HeLa、及びMOLT-4に対して細胞損傷作用を示す。しかし、B.thuringiensis B462株のクリスタル蛋白質はMOLT-4に対して細胞損傷作用を示さず、このような特性は新しいパラスポリン即ちParasporin 1Ac2によるものと考えられる。Parasporin 1Ac2遺伝子は、その塩基配列解析結果に基づき、777アミノ酸からなる86.8kDaの蛋白質をコードしていると推定された。Parasporin 1Ac2はパラスポリンParasporin 1Aaのアミノ酸配列を比較するとC末端側領域に違いが認められる。前者がMOLT-4に対して損傷活性を示さないのに対して後者が損傷活性を示すのは、これらのアミノ酸配列の違いによるものであると推定している。