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細胞接着因子及び遺伝子担持アパタイト層による、骨形成を促進する骨補填材の開発

利用细胞粘附因子和携带基因的磷灰石层开发促进骨形成的骨替代材料

基本信息

批准号：
07F07607
负责人：
大矢根綾子
金额：
$ 1.47万
依托单位：
National Institute of Advanced Industrial Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

骨欠損部において周囲の骨形成を促進し、周囲の骨と直接結合して一体化する材料は、骨組織再生用スキャホールドや骨補填材として有用である。本研究は、人工材料表面に細胞接着因子及び遺伝子担持アパタイト層(DF-Ap層)を形成させることにより、上記の特性を有する材料を開発するための基礎的指針を明らかにすることを目的とする。本年度は、DNAとして骨形成タンパク質-2(BMP-2)のcDNAを含むプラスミドを、細胞接着因子としてフィブロネクチンを用い、人工材料基板表面にDF-Ap層を形成させた。得られた試料の生物学的性質を、骨芽細胞様のMC3T3-E1細胞を用いたin vitro実験、及びラットin vivo実験により評価し、以下の成果を得た。in vitro実験成果:人工材料表面にDF-Ap層を形成させることにより、材料上へのMC3T3-E1細胞の接着を促進することができ、これにより同細胞の骨分化を効率的に誘導できることを明らかにした。in vivo実験成果:人工材料表面にDF-Ap層を形成させることにより、異物反応を引き起こすことなく、材料周辺の骨形成を促進できることを明らかにした。上記のin vitro及びin vivo実験の結果は、DF-Ap層からフィブロネクチンを除いた系では確認されなかった。DF-Ap層中に担持されたフィブロネクチンが細胞の接着を促すことにより、同接着細胞へのBMP-2遺伝子の導入効率を高め、MC3T3-E1細胞の骨分化並びにin vitro骨形成を促進したものと考えられる。以上の研究により、DF-Ap層による細胞への遺伝子導入システムがin vitroだけでなくin vivoにおいても有効であり、同システムを利用して骨形成を促進する材料を作製できることが分かった。本遺伝子導入システムはウィルスを用いない安全なシステムであることから、骨組織再生用スキャホールドや骨補填材への応用が期待できる。

Bone formation in the damaged part of the bone is promoted, and the bone in the surrounding part is directly integrated. Materials for bone tissue regeneration are also useful. This study is aimed at the formation and development of cell adhesion factors and gene support layers (DF-Ap layers) on artificial materials. This year, DNA and BMP-2 cDNA were used to form a DF-AP layer on the surface of an artificial material substrate. The biological properties of the test samples, the use of MC3T3-E1 cells in vitro and in vivo were evaluated. The following results were obtained. In vitro results: DF-AP layer formation on artificial material surface, MC3T3-E1 cell adhesion promotion on material surface, induction of bone differentiation rate of the same cell In vivo, the DF-AP layer on the surface of artificial materials is formed. The results of the above in-vitro and in-vivo experiments confirm that the DF-AP layer is not stable. DF-Ap layer supports high efficiency of BMP-2 gene introduction into MC3T3-E1 cells and promotes bone differentiation and in vitro bone formation in MC3T3-E1 cells In the above study, DF-AP layer was used to introduce gene into cells in vitro and in vivo. The present invention is intended for use in bone tissue regeneration and bone filling.