高等植物における相同組み換え制御因子の解析と効率的ジーンダーゲッティングへの活用

高等植物中同源重组调节因子的分析及其在有效基因靶向中的应用

• 批准号: 07J00732
• 负责人: 遠藤 真咲
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: National Institute of Agrobiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J00732/
• 关键词: イネ; 細胞周期; ジーンターゲッティング; 相同組み換え; アラビドプシス

細胞周期制御による相同組換え効率の向上オープンなクロマチン構造をとり、姉妹染色分体の存在する細胞周期S-G2期は、DNA損傷修復機構として相同組換え修復が選択されやすい時期である。そこで、遺伝子相同組換え機構を利用するジーンターゲッティングの効率を向上させるには、S-G2期を延長させることが有効であると考え、イネ、シロイヌナズナを用いて、S-G2期延長法の確立を目指した研究を行っている。H20年度は、G2/M期の進行遅延を目的として、G2/M期の移行に関わるCDKB2の発現を抑制したイネを作出し、表現型の解析を行った。OsCDKB2恒常的RNAiを導入したイネカルスの核相を測定したところ、2Cの減少および、4Cの増加が観察され、予想通りG2/M期の進行遅延が生じていることが明らかとなった。しかし、OsCDKB2の恒常的な発現抑制は、再分化後のイネの生育に阻害的な効果を及ぼしたため、薬剤の添加により発現誘導が可能なOsCDKB2誘導的RNAiコンストラクトを作成し、形質転換を行った。誘導的RNAi形質転換カルスにおいては、G2/M進行阻害が薬剤の添加、除去により可逆的に制御可能であることを確認した。次世代の獲得を待って、ジーンターゲッティング効率の評価を行う予定である。また、OsCDKB2RNAiを導入した系統の一部では、8Cや16Cといった高次倍化が観察され、高次倍数性を示す細胞では核内染色体数も倍加していたことから、OsCDKB2の発現抑制は、endomitosisを誘導することが明らかとなった。イネにおいては胚乳以外の組織でDNA量の倍加が生じた報告はこれまでないことから、本発見は、イネ科植物の倍数性進化を考える上でも大変興味深いものであり、その理由については今後詳細な解析を進めていく予定である。

Cell cycle suppression に よ る in same group え の sharper rate upward オ ー プ ン な ク ロ マ チ ン tectonic を と り, and sisters chromatid の is す る cell cycle S - G2 は, DNA damage repair institutions と し て in same group え repair が sentaku さ れ や す い period で あ る. そ こ で, heritage 伝 son in the same group え agencies を using す る ジ ー ン タ ー ゲ ッ テ ィ ン グ の を sharper rate upward さ せ る に は, S - G2 を extended さ せ る こ と が have sharper で あ る と え test, イ ネ, シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ を with い て, S - G2 の extension method to establish を refers し た を line っ て い る. H20 annual は, G2 / M phase の 遅 delay を purpose と し て, G2 / M phase の transitional に masato わ る CDKB2 の 発 now を inhibit し た イ ネ を し, phenotype の parsing line を っ た. OsCDKB2 constant RNAi を import し た イ ネ カ ル ス の nuclear phase を し た と こ ろ, 2 c の reduce お よ び, 4 c の raised が 観 examine さ れ, to think り G2 / M phase の 遅 delay が raw じ て い る こ と が Ming ら か と な っ た. し か し, OsCDKB2 の constant な 発 now after は, redifferentiation の イ ネ の fertility に resistance against な unseen fruit を and ぼ し た た め, 薬 tonic の add に よ り 発 induced が may now な OsCDKB2 induction of RNAi コ ン ス ト ラ ク ト を し, consummate form quality planning in line を っ た. Induction of RNAi form quality planning in カ ル ス に お い て は, G2 / M resistance against が 薬 tonic の add, remove に よ り reversible に suppression may で あ る こ と を confirm し た. Nextgen の get を stay っ て, ジ ー ン タ ー ゲ ッ テ ィ ン グ sharper rate の review 価 を line う designated で あ る. ま た, OsCDKB2RNAi を import し た system の a で は, 8 c や 16 c と い っ た high times が 観 examine さ れ, higher order multiples を で す cells in は chromosome number within the nuclear も doubly し て い た こ と か ら, OsCDKB2 の 発 は, now endomitosis を induced す る こ と が Ming ら か と な っ た. イ ネ に お い て は outside の organization で endosperm DNA quantity の doubly が raw じ た report は こ れ ま で な い こ と か ら, see this 発 は, イ ネ plants の ploidy evolution を え test on る で も big - tumblers deep い も の で あ り, そ の reason に つ い て は detailed analytical を な into future め て い く designated で あ る.

项目成果

ジーンターゲッティングによる植物ゲノムのピンポイント改変

通过基因打靶精确修饰植物基因组

• 发表时间: 2008
• 作者: Masaki Endo;Seiichi Toki;遠藤真咲;遠藤真咲
• 通讯作者: 遠藤真咲

細胞周期制御による遺伝子相同組換え効率向上の試み

尝试通过细胞周期控制提高基因同源重组效率

• 发表时间: 2007
• 作者: Masaki Endo;Seiichi Toki;遠藤真咲;遠藤真咲;土岐精一;遠藤真咲
• 通讯作者: 遠藤真咲

ジーンターゲッティングによる植物遺伝子のピンポイント改変

通过基因打靶精确修饰植物基因

• 发表时间: 2007
• 期刊: STAFF newsletter
• 作者: 土岐精一;清水力;遠藤真咲;雑賀啓明;阿部清美;刑部敬史;遠藤真咲;遠藤真咲;Masaki Endo;遠藤真咲
• 通讯作者: 遠藤真咲

高等植物における相同組換え修復

高等植物中的同源重组修复

• 发表时间: 2007
• 作者: Masaki Endo;Seiichi Toki;遠藤真咲;遠藤真咲;土岐精一
• 通讯作者: 土岐精一

イネにおけるCDKB2の発現抑制は endomitosis を誘導する

水稻中 CDKB2 表达的抑制诱导内有丝分裂

• 发表时间: 2009
• 作者: 遠藤真咲;中由繁樹;梅田正明;土岐精一
• 通讯作者: 土岐精一