優勢卵胞ダブル選抜モデルによるウシ卵胞選抜遺伝子の機能解析と排卵誘起法への展開

利用优势卵泡双重选择模型对牛卵泡选择基因进行功能分析并开发诱导排卵方法

• 批准号: 07J02379
• 负责人: 林 憲悟
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: National Institute of Agrobiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J02379/
• 关键词: 家畜繁殖; 牛; 卵巣; 卵胞発育

ウシ卵胞におけるセリンプロテアーゼインヒビターファミリー遺伝子発現の解析セリンプロテアーゼインヒビター(SERPIN)は、線溶系、炎症系、細胞分化などに関与するプロテアーゼ群を制御する。本研究では、ウシ卵胞におけるSERPINファミリー遺伝子の発現および局在を解析した。黒毛和種雌ウシより、直径が最大の優勢卵胞(10.7±0.7mm)と二番目に大きい次席卵胞(7.8±0.2mm)を採取した。各卵胞から総RNAを抽出し、ウシオリゴDNAマイクロアレイおよびリアルタイムPCR法を用いて、SERPINファミリーの遺伝子発現を解析した。さらに、食肉処理場由来のウシ卵胞(直径>8mm)を、卵胞液中ステロイド濃度を基に健常または閉鎖に分類し、マイクロアレイ解析で発現に変化が見られたSERPINのうち、ウシ卵胞で発現していることが初めて明らかとなった4個について、in situハイブリダイゼーション法によりmRNA発現局在を解析した。マイクロアレイ解析の結果、ウシ卵胞において11個のSERPIN遺伝子の発現が認められた。優勢卵胞では5個のSERPIN遺伝子(SERPINA5,B6,E2,F2,H1)の発現が高く、次席卵胞では2個(SERPINE1,G1)の発現が高いことが明らかとなった。また、In situハイブリダイゼーションの結果、SERPINA5、SERPINB6およびSERPINF2 mRNAは健常卵胞の顆粒層にのみ局在し、SERPING1 mRNAは閉鎖卵胞の顆粒層および卵胞膜で発現していることが明らかとなった。以上から、SERPINファミリーがウシ卵胞の健常性の違いにより特徴的な発現を示し、卵胞発育および閉鎖に関与している可能性が示された。

ウ シ follicle に お け る セ リ ン プ ロ テ ア ー ゼ イ ン ヒ ビ タ ー フ ァ ミ リ ー posthumous son 伝 発 is の parsing セ リ ン プ ロ テ ア ー ゼ イ ン ヒ ビ タ ー (SERPIN) は, line dissolved, inflammation, cell differentiation な ど に masato and す る プ ロ テ ア ー ゼ group を suppression す る. This study で は, ウ シ follicle に お け る SERPIN フ ァ ミ リ ー posthumous son 伝 の 発 now お よ び bureau in analytical し を た. Black hair and a female ウ シ よ り, が の biggest advantage follicle diameter (10.7 + / - 0.7 mm) と two times big eye に き い second follicle (7.8 + / - 0.2 mm) を take し た. Each follicle か ら を 総 RNA extraction し, ウ シ オ リ ゴ DNA マ イ ク ロ ア レ イ お よ び リ ア ル タ イ を ム PCR method with い て, SERPIN フ ァ ミ リ ー の heritage 伝 son 発 now を parsing し た. さ ら に, carnivorous 処 field origin の ウ シ follicle diameter (8 mm) > を, follicle fluid in ス テ ロ イ ド concentration を base に health often ま た は atresia に classification し, マ イ ク ロ ア レ イ parsing で 発 に now - the が see ら れ た SERPIN の う ち, ウ シ follicle で 発 now し て い る こ と が early め て Ming ら か と な っ た four に つ い て in In situハ ブリダ ブリダ ゼ ハ ショ ショ <s:1> mRNA is located in を analysis of を た. The analysis of the <s:1> results of ウシ て ロアレ ロアレ ウシ shows that 11 <s:1> SERPIN relics 伝 of ウシ oocytes are found to be が recognized められた. Five advantages of follicle で は の SERPIN heritage 伝 child (SERPINA5, B6, E2, F2, H1) の 発 が く, now second follicle で は 2 (SERPINE1, G1) の 発 now が high い こ と が Ming ら か と な っ た. ま た, the In situ ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン の results, SERPINA5, SERPINB6 お よ び SERPINF2 mRNA は health often follicle の granular layer に の み bureau In し, SERPING1 mRNA は atresia follicle の granular layer お よ び follicle membrane で 発 now し て い る こ と が Ming ら か と な っ た. Above か ら, SERPIN フ ァ ミ リ ー が ウ シ follicle の health constancy の violations い に よ り of 徴 な 発 now を し, follicle 発 yukon お よ び atresia に masato and し て い が る possibility in さ れ た.

项目成果

ウシ卵胞におけるセリンプロテアーゼインヒビターファミリー遺伝子発現の解析

牛卵泡丝氨酸蛋白酶抑制剂家族基因表达分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 蛭田眞平;馬渡駿介;S.F. Hiruta and S.F. Mawatari;林憲悟
• 通讯作者: 林憲悟

Genome-wide gene expression profiling of bovine follicles : Identification of genes involved in the growth of dominant follicles by microarray analysis

牛卵泡的全基因组基因表达谱：通过微阵列分析鉴定参与优势卵泡生长的基因

• 发表时间: 2008
• 作者: 蛭田眞平;馬渡駿介;S.F. Hiruta and S.F. Mawatari;林憲悟;Ken-Go Hayashi
• 通讯作者: Ken-Go Hayashi