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大腸菌走化性における受容体超分子クラスターを介したシグナル伝達制御機構の解析

受体超分子簇介导的大肠杆菌趋化信号转导调控机制分析

基本信息

批准号：
07J02563
负责人：
入枝泰樹
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

大腸菌走化性はシグナル伝達の研究分野におけるモテルシステムである.中でも,中心的な課題となっているのが走化性シグナルの増幅および増幅率(ダイン)制御機構の解明である.走化性受容体は菌体の極で巨大なクラスターを形成する.クラスター内での受容体タイマー間相互作用を介して隣接する受容体ダイマーへとシグナルが伝わり,シグナル増幅が起こるとされているが,その詳細は不明である.特に,極クラスターが巨大な膜タンパク質複合体であることによる扱いの困難さから,受容体間相互作用の分子基盤についてはこれまで詳細な解析が行われてこなかった.私は,これまでの実験で単独の受容体を発現させ,ダイマー間相互作用変化を検出することでゲイン制御機構の解明に寄与してきたが,この状況下では全ての受容体に誘引物質が結合可能であり,クラスター内で隣接する受容体ダイマー間をシグナルが伝達したかどうかを判断するのは困難であった.そこで,大腸菌が4種類の走化性受容体をもつことに着目した.これらの受容体は混合クラスターを形成すると考えられているので,2種類の受容体(アスパラギン酸受容体Tar,セリン受容体Tsr)の共発現系を用いれば上記の課題をクリアできる.ダイマー間相互作用の検出はin vivoでのS-S架橋形成を利用した.はじめに,Tar架橋形成がTsr存在下で阻害されることから,混合クラスター形成を確認した.続いて,Tar-Tsrダイマー間で架橋したヘテロダイマーを検出し,異種受容体間相互作用が存在することを示唆した.Tar特異的な誘引物質であるメチルアスパラギン酸の添加によって,Tar-Tar架橋だけでなく,Tar-Tsr架橋,Tsr-Tsr架橋にも影響がみられたことから,クラスター内における膜に水平な方向へのシグナル伝達が示唆された.このシグナル伝達方式が走化性シグナルの増幅機構に関与していると考えられる.

E. coli transmissibility and resistance to infection. In the middle, the central problem is to change the characteristics of the system and the control mechanism of the system. A flexible receptor is formed on the cell's pole. The interaction between the receptors in the container is mediated by the interaction between the receptors in the container. In particular, the extremely large membrane complex is difficult to analyze in detail, and the interaction between receptors and molecular substrates is difficult to analyze in detail. In this case, it is difficult to determine whether the interaction between the two receptors is possible to combine with the attractive substances in the whole receptor. There are four kinds of E. coli and four kinds of transformative receptors. The co-occurrence system of two kinds of receptors (acid receptor Tar, acid receptor Tsr) is used in the formation of mixed receptors. S-S bridge formation in vivo. Tar bridge formation is confirmed in the presence of Tsr. Tar-Tsr bridging, Tsr-TsrTsr-TsrT This paper discusses the relationship between the structure and the structure of the structure.