神経病原性を示すトリレトロウイルスの分子系統解析とこれを基礎とした制圧の試み

神经致病性禽逆转录病毒的分子系统发育分析以及基于该分析的根除努力

基本信息

  • 批准号:
    07J04098
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.15万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2007
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2007 至 2008
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

「トリの神経膠腫fowl glioma」はトリ白血病ウイルス(ALV)A亜群に属する,トリの神経膠腫誘発ウイルス(FGV)により惹起される。本研究課題の目的はFGVの神経病原因子を明らかにし,RNA干渉(RNAi)により本疾患を制圧することである。まず,ALVの病原性に関与すると言われているenv遺伝子の中からRNAiの標的として3つの領域を選び,各々に対するsiRNAを作製した。RNAi効果を検討するため,FGVを鶏胎子線維芽細胞由来株化細胞DF-1に感染させたのち,siRNAをトランスフェクションした。細胞からRNAを抽出してリアルタイムRT-PCRで検索したところ,3種類いずれのsiRNAでも効果が認められなかった。RNAiによる遺伝子発現の抑制効果は,その標的の塩基配列に大きく依存する。その一方,FGVと変異株のenv遺伝子の中で塩基配列が完全に一致し,かつ病原性に関連すると予想された領域は非常に限られていた。従って,今回検討した標的配列でRNAiを適用するのは困難であると考えられた。一方,env遺伝子中の病原性関連領域を絞り込むため,ALV-A由来の分子クローンRCAS(A)を基に,そのenv遺伝子内SU領域をFGVのそれと入れ替えたキメラウイルスを作製した。このキメラウイルスをSPF鶏胚の卵黄嚢内に接種し,現在経過観察中である。さらに,国内の採卵鶏に発見された神経膠腫から分離されたウイルス,TymS_90の病原性を確認するため,SPF鶏胚の卵黄嚢内に接種し,孵化後,脳を検索した。本実験感染鶏にもFGV感染鶏と同等の神経膠腫が認められた。さらに,採卵鶏の自然発生例と同様の小円形細胞の増殖巣が認められた。TymS_90とFGVのゲノムは全く異なっていることから,TymS_90は第二の神経膠腫誘発ウイルスであると考えられた。
"Neuroglioma fowl glioma" is caused by leukemia group A (ALV) and neuroglioma induction group A (FGV). The purpose of this study is to clarify the role of FGV neuropathogenic factors in the control of FGV by RNA interference. In addition, the pathogenicity of ALV is related to the expression of RNAi target in the env gene. RNAi gene expression in vitro was detected by FGV gene expression in cultured DF-1 cells. Cell RNA is extracted from the genome of the virus by RT-PCR. Three types of siRNA are identified. The inhibition effect of RNAi gene expression is dependent on the gene alignment of the target. On the other hand,FGV and env genes are completely consistent, and the pathogenic association is expected to be very limited. This is the first time that we've seen this. On the one hand, the pathogenic-related domain in env gene is divided into two parts: ALV-A origin molecule, RCAS(A), and SU domain in env gene. The egg yolk of SPF embryos is inoculated with the virus, and the virus is now detected. In the meantime, the pathogenicity of TymS_90 was confirmed after the development of glioma in China, and the egg yolk of SPF embryo was inoculated and tested after incubation. This infection is caused by FGV infection, which is equivalent to brain swelling. In addition, the natural development of egg harvesting and the proliferation of small cells in the same way are recognized. TymS_90 and FGV are completely different. TymS_90 and FGV are completely different.

项目成果

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专利数量(0)
Detection of Avian leukosis virus genome by a nested polymerase chain reaction using DNA and RNA from dried feather shafts
採卵鶏に発生したいわゆるトリの神経膠腫の病理学的所見と疫学的考察
产蛋鸡中发生的所谓禽神经胶质瘤的病理学发现和流行病学考虑
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    畑井仁;落合謙爾;他6名
  • 通讯作者:
    他6名
Prevalence of fowl glioma in Japan and the causal avian leukosis viruses
日本家禽神经胶质瘤的患病率和致病禽白血病病毒
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Hatai;H.;Ochiai;K.;他3名
  • 通讯作者:
    他3名
Prevalence of fowl glioma-inducing virus in chickens of zoological gardens in Japan and nucleotide variation in the env gene
  • DOI:
    10.1292/jvms.70.469
  • 发表时间:
    2008-05-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    1.2
  • 作者:
    Hatai, Hitoshi;Ochiai, Kenji;Umemura, Takashi
  • 通讯作者:
    Umemura, Takashi
A recombinant avian leukosis virus associated with fowl glioma in layer chickens in Japan
  • DOI:
    10.1080/03079450801898815
  • 发表时间:
    2008-01-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    2.8
  • 作者:
    Hatai, Hitoshi;Ochiai, Kenji;Umemura, Takashi
  • 通讯作者:
    Umemura, Takashi
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  • 通讯作者:
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