シェーグレン症候群発症における分子機構の解明

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目的:シェーグレン症候群(SS)の唾液腺特異的自己抗原であるM3ムスカリン性アセチルコリン受容体(M3R)をターゲットとし、SSモデルマウスの作成、およびモデルマウスを用いてSSの発症、進行の機序を明らかにすることを目的とした。方法:1)M3R細胞外領域をコードする合成ペプチドのmix(それぞれ20ug)と完全フロイドアジュバント(CFA)でエマルジョンを作製し、M3R欠損マウス(M3R KO)に免疫をした。初回免疫10日後にM3R peptide mixを追加免疫した。追加免疫10日後の脾臓を単離し、M3R peptide mixを抗原として、脾細胞を72時間培養した。2)また、追加免疫10日後の脾細胞をRag1欠損マウス(Rag1 KO)に1x10^7細胞をi.vで移入した。移入45日後の唾液量、および血清中における抗M3R抗体の測定をおこなった。3)さらに、移入45日後の唾液腺、および涙腺を単離し、HE染色、および免疫組織化学染色法を用いて、組織学的検討を行った。結果:1)M3R peptide mix免疫C57BL/6マウスと比較して、M3R KO由来の脾細胞からIFNγ、IL17の高い産生が認められた。2)C57BL/6由来脾細胞を移入したRag1 KOマウスと比較して、M3R KO由来脾細胞を移入したRag1 KOマウスにおいて、唾液量の減少が認められた。また、同マウスにおいて、抗M3R抗体が検出された。3)移入45日後、M3R KO由来脾細胞を移入したRag1 KOマウスの唾液腺においてのみ細胞浸潤が認められた。涙腺においても軽度の浸潤が認められた。さらに、免疫組織学染色法の結果から、浸潤しているほとんどの細胞がCD4陽性T細胞であることが明らかとなった。一方でB細胞、およびCD8陽性細胞の浸潤はあまり認められなかった。考察:M3R KOマウスにM3R peptide mixを免疫することで、IFNg/IL17の高い産生が認められた。さらに、それらの細胞をRag1 KOマウスに移入することで、唾液量の低下、およびCD4陽性T細胞の唾液腺への浸潤が認められた。これらのことから、今回樹立したマウスがSSにおいて有用なモデルであることが考えられた。今後、このモデルを用いてのSSの新規治療法の開発が期待される。