筋系譜ライブイメージングによる筋形成の時空間的制御におけるミオスタチン機能の解明

筋特異的発現プロモーター(α-actih promoter)を用いて、zMstn full(Mstnの機能亢進)、活性型zMstnに結合してその活性を抑制することが知られている,zMstn1-ΔBMP1 cleavage site-propeptide(Mstnの機能抑制)を筋肉特異的に発現するトランスジェニックゼブラフィッシュをそれぞれ作出した。受精後1ヶ月あたりからzMstn full lineでは筋肉量の減少、逆にzMstn1-ΔBMPI cleavage site-propeptide lineでは筋肉量に増加の傾向が顕著になり、ゼブラフィッシュにおけるmyostatinの機能がマウスと同じ筋肉量の負の制御であることが示唆された。これらの筋肉量の増減が筋線維の増殖・肥大によるものなのかを調べるため、また筋肉以外の組織への影響を調べるために,これらのトランスジェニックゼブラフィッシュの成魚の全身切片を作製した。その結果、筋肉以外(内臓等)に顕著な差は認められず、zMstn full lineにおいては筋線維の本数および断面積に減少、zMstn1-ΔBMP1 cleavage site-propeptide lineにおいては筋線維の本数および断面積に増加の傾向が認められた。これらの結果は、Mstnのノックアウトマウスで見られた骨格筋の増殖・肥大による筋肉量の増加と同様の結果であり、このことはMstnによる筋肉量の負の制御が、マウスとゼブラフィッシユで同じメカニズムであることを強く示唆するものである。zebrafishにおいては受精後1ヶ月あたりまで顕著な差が認められないが、zMstnの発現は72hpfあたりから顕著に増加していることから、この時期の筋形成をより詳細に調べるため、現在骨格筋の増殖および融合を可視化したゼブラフィッシュを作出した。

筋特異的発現プロモーター(α-actih promoter)を用いて、zMstn full(Mstnの機能亢進)、活性型zMstnに結合してその活性を抑制することが知られている,zMstn1-ΔBMP1 cleavage site-propeptide(Mstnの機能抑制)を筋肉特異的に発現するトランスジェニックゼブラフィッシュをそれぞれ作出した。受精後1ヶ月あたりからzMstn full lineでは筋肉量の減少、逆にzMstn1-ΔBMPI cleavage site-propeptide lineでは筋肉量に増加の傾向が顕著になり、ゼブラフィッシュにおけるmyostatinの機能がマウスと同じ筋肉量の負の制御であることが示唆された。これらの筋肉量の増減が筋線維の増殖・肥大によるものなのかを調べるため、また筋肉以外の組織への影響を調べるために,これらのトランスジェニックゼブラフィッシュの成魚の全身切片を作製した。その結果、筋肉以外(内臓等)に顕著な差は認められず、zMstn full lineにおいては筋線維の本数および断面積に減少、zMstn1-ΔBMP1 cleavage site-propeptide lineにおいては筋線維の本数および断面積に増加の傾向が認められた。これらの結果は、Mstnのノックアウトマウスで見られた骨格筋の増殖・肥大による筋肉量の増加と同様の結果であり、このことはMstnによる筋肉量の負の制御が、マウスとゼブラフィッシユで同じメカニズムであることを強く示唆するものである。zebrafishにおいては受精後1ヶ月あたりまで顕著な差が認められないが、zMstnの発現は72hpfあたりから顕著に増加していることから、この時期の筋形成をより詳細に調べるため、現在骨格筋の増殖および融合を可視化したゼブラフィッシュを作出した。