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脂質ラフトにおける効率的なシグナル伝達の分子機構の解明

阐明脂筏有效信号转导的分子机制

基本信息

批准号：
07J08175
负责人：
須釜淳
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J08175/
关键词：
脂質ラフト Gタンパク質ガングリオシド細胞内情報伝達

项目摘要

脂質ラフトはスフィンゴ糖脂質やコレステロールの集積により形成されるマイクロドメインで、情報伝達を効率的に行う場として注目されている。私はこれまでにスズメバチ毒のマストパラン(MP)が脂質ラフトのガングリオシドに結合し、脂質ラフトに局在する三量体Gタンパク質をGαとGβγに解離してGαを細胞質へ遊離させることを見いだした。また、その結果Gタンパク質共役型受容体(GPCR)刺激によるGαシグナルが抑制されると共に、細胞膜に残されたGβγからのシグナルが活性化されることが示唆された。以上のようにMPは非常にユニークな作用機構によりGPCRシグナルの機能制御を行っており、その作用機構の全容解明は脂質ラフトの機能や意義を明らかにする手がかりになると考えられた。そこで本研究ではMPの作用機構の解明を目的とし、MPがGαを細胞質に遊離する機構について検討を行った。タンパク質の翻訳後修飾はその機能や細胞内局在などに重要である。そこでMPがGαのタンパク質修飾に影響を及ぼすことで局在を変化させているか解析を行った。Gタンパク質の脂質修飾は細胞膜及び脂質ラフトヘの局在に重要であることから、パルミトイル基をbiotin-HPDPを用いて標識し、MPによってGαsの脱パルミトイル化が促進するか調べた。しかしMPはGαsのパルミトイル化には影響を及ぼさなかった。また、リン酸化やモノユビキチン化を受けることによって細胞膜からサイトゾルに局在変化するタンパク質が知られていることから、次にGαs-GFPを発現させた細胞をMP処理後に免疫沈降を行い、Gαs-GFPのリン酸化及びユビキチン化を検討した。しかし、MPによるリン酸化やユビキチン化は検出されなかった。以上の結果より、MPによるGαの細胞膜からサイトゾルへの遊離はタンパク質の修飾系に影響するためではないことが示唆された。

Lipid concentration, lipid concentration, The three quantities of G α and G βγ are dissociated from G α and Gβγ and dissociated from Gα and cytosol. As a result, G α γThe function control mechanism of the GPCR system is described in detail above. In this study, the mechanism of MP action was investigated. After the transformation of the quality of the cell, the function of the cell is important. This paper analyzes the influence of MP on the quality of products. The lipid modification of Gαs plays an important role in cell membrane and lipid metabolism. The impact of MP's transformation on the environment and the environment The expression of Gαs-GFP was detected in the cells after MP treatment, and the expression of G α s-GFP was detected in the cells after MP treatment. The first step is to reduce the cost of production and improve the quality of production. The above results demonstrate that the modification system of free mitochondria in the cell membrane of Gα from the support wall to the MP is affected.