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PI 3-kinaseによる開口放出制御機構の解明

阐明 PI 3-激酶的胞吐控制机制

基本信息

批准号：
18700322
负责人：
板倉誠
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18700322/
关键词：
開口放出 PI 3-kinase Protein kinase B シナプス小胞 PICK1 Arfapitn Arfaptin2

项目摘要

本研究では、ホスファチジルイノシトールリン酸化酵素PI 3-kinaseが神経伝達物質放出を制御する分子機構を解明することを目的としている。本年度は、昨年確立した抗体を化学架橋した磁気ビーズを用いる単離法によって、Vesicular glutamate transporter (VGluT)を含む興奮性シナプス小胞、Vesicular GABA transporter (VGAT)を含む抑制性シナプス小胞を精製した。精製したそれぞれの小胞タンパク質をSDS-PAGEし、CBB染色した。結果、数十種類のタンパク質を提示できた。ほとんどのタンパク質は2種類の小胞間で共通であったが異なるタンパク質も存在した。質量分析器を用いてこれらタンパク質の解析を行った。また、ホスファチジルイノシートルリン脂質に結合するとされるPICK1およびそのファミリータンパク質が神経伝達物質放出制御に関与しているかの検討を行った。その結果、PICK1およびファミリータンパク質Arfaptin 2がシナプス小胞に結合していることがわかった。またArfaptin 2をPC12細胞に強制発現させると神経伝達物質放出が抑制されることが明らかとなった。次にArfaptin 2 にはPI 3-kinaseの下流にあるProtein kinase B のリン酸化サイトがあるので、そのサイトに対するリン酸化抗体を作製した。作製した抗体を用いてウエスタンブロッテイングによる解析を行った。さらに免疫沈降実験からPICK1に小胞輸送にICA69が結合していることを見出した。

The aim of this study is to elucidate the molecular mechanism of the enzyme PI 3-kinase that regulates the release of neurotransmitters. This year, we established that the antibody chemical bridge is used in the purification process, and the vesicular glutamate transporter (VGluT) is used in the purification of the excitatory and inhibitory cells. SDS-PAGE and CBB staining were used to purify the cells. Results, dozens of types of quality tips. There are two kinds of cells in common. Mass analyzer is used for mass analysis. A study of the relationship between lipid binding and the release of substances from the brain was carried out. Results: PICK1, PICK2, PICK3, PICK4, PICK5, PICK6, PICK7, PICK8, PICK9, PICK9, PICK Arfaptin 2 cells were exposed to stress and inhibited by release of neurotransmitter substances. Arfaptin 2 protein kinase B Protein kinase downstream protein kinase B protein kinase downstream protein kinase downstream protein kinase downstream The analysis of the antibody was carried out. PICK1 cell transport ICA69 binding to the immune system

项目成果

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专著数量（0）

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会议论文数量（0）

专利数量（0）

Phosphorylation of adult type Sept5 (CDCrel-1) by cyclin-dependent kinase 5 inhibits interaction with syntaxin-1.

细胞周期蛋白依赖性激酶 5 对成体型 Sept5 (CDCrel-1) 的磷酸化会抑制与 Syntaxin-1 的相互作用。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
J Biol. Chem. 282(11)
影响因子：
0
作者：
Taniguchi M;Taoka M;Itakura M;Asada A;Saito T;Kinoshita M;Takahashi M;Isobe T;Hisanaga S
通讯作者：
Hisanaga S

Exocytotic release of signaling molecules from astrocytes.

星形胶质细胞胞吐释放信号分子。