ナトリウムを介した骨格筋特異的カルパインp94によるシグナル伝達について

关于骨骼肌特异性钙蛋白酶 p94 介导的钠介导的信号转导

• 批准号: 18700392
• 负责人: 尾嶋 孝一
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18700392/
• 关键词: p94; 骨格箭; カルパイン; 骨格筋; ナトリウム

昨年度までにin vitroにおいてp94がNa^+濃度依存的に自己消化活性を引き起こすこと,ならびに培養骨格筋細胞に存在する内因性のp94が薬剤刺激においてNa^+により活性化することを示した。しかし,p94の標的分子を検出,その標的分子の酵素学的な切断箇所,その標的分子およびp94の自己消化断片の生理学的な機能を明らかにすることまでには至っていなかった。本年度はp94の酵素学的な標的分子の検出に重点を置き研究を進めた。マウス骨格筋組織あるいは培養マウス骨格筋細胞を試料とし,p94特異的に認識する抗体を用いて免疫沈降を行い,沈降してきたタンパク質複合体をNano-Liquid-Chromatographyにて展開後に,質量分析計で解析し,タンパク質複合体に含まれる分子を網羅的に同定し,その中からp94の基質候補分子の探索を行った。質量分析計で解析した結果,タンパク質複合体の中からp94が見出されたことから,この系が機能することは確認できた。免疫沈降複合体からおよそ30個の分子を同定した。その中の約半分がミトコンドリアあるいは細胞膜由来の分子であり,約30%が細胞質内に存在する酵素および細胞骨格を構成する分子であった。残りが機能未知のタンパク質であった。この結果,p94はミトコンドリア,細胞膜といった膜系においてタンパク質複合体を構成し存在することが示唆された。質量分析計で解析した結果,スコアが高い分子から順番に目的とする分子のcDNAを得た後に,発現ベクターを作成し,COS7細胞にp94と強制発現させることで酵素学的な基質の可能性を検討した。現在まで6つの分子を試したものの,p94の酵素学的な基質となる分子は見出せてはいない。さらなる分子において基質の可能性を探る必要がある。

Last year, the degree-dependent digestion activity of p94 in vitro + led to the growth of skeletal tendons, which was caused by the presence of internal causes, p94 stimulation, Na ^ + activation. The molecule of p94 gene is isolated, the enzyme of molecular enzyme is cut off, the molecule of yeast is digested by p94, and the physiological machine is able to tell the truth that it can be digested by itself. This year's "p94" enzyme research focuses on the development of molecular biology. The tissue of bone latticework, the tissue of bone lattice, the cell of bone lattice, the antibody of p94 specific antibody, the immunogenicity of fusion protein, the synthesis of Nano-Liquid-Chromatography, the analysis of quantitative analysis, and the identity of molecular network were used in this paper. In the middle of the study, the p94 gene candidate molecule is exploring the line. After analyzing the results of the quantitative analysis program, we found that p94 was used in the integrated system to make sure that the computer was in good condition. The immuno-descending complex was homologous to 30 molecules. The membrane of the cell is derived from the cell membrane, and about 30% of the cells contain enzymes, cells and bone lattices. The disabled machine is not known to be able to cause a crash. The results showed that p94 was found to be abnormal, and the membrane and membrane systems were not affected by the presence of a complex. Based on the results of quantitative analysis, the results of the quantitative analysis program showed that the molecular cDNA was obtained, and the COS7 cell p94 was used to strengthen the possibility of enzymology. At present, the molecular structure of p94 zymography is different from that of p94 enzyme. It is necessary to explore the possibility of molecular analysis.

项目成果

骨格筋特異的なカルパインp94の遺伝子改変セゥスは筋ジストロフィー様の症状を呈する

骨骼肌特异性钙蛋白酶 p94 基因修饰的 S. ceusus 表现出肌营养不良症样症状。

• 发表时间: 2007
• 作者: 尾嶋 孝一;川畑 順子;中尾 晴美;小野 弥子 土井 奈穂子;北村ふじ子;秦勝志. 川原 裕之;Christian Witt;Siegfride Labeit;鈴木 紘一;阿部 啓子;前田 達哉;饗 場篤;反町 洋之
• 通讯作者: 反町 洋之

Myogenic stage,sarcomere length,and protease activity modulate localination of muscle-specific calpain

生肌阶段、肌节长度和蛋白酶活性调节肌肉特异性钙蛋白酶的定位

• 发表时间: 2007
• 期刊: Journal of Biological Chemistry 282
• 作者: K.Oiima. Y.Ono;N.Doi;K.Yoshioka;Y.Kawabata;S.Labeit;and H.Sorimachi.
• 通讯作者: and H.Sorimachi.

骨格筋特異的なカルパインp94/calpain 3のサルコメア長に依存した局在変化

骨骼肌特异性钙蛋白酶 p94/钙蛋白酶 3 的肌节长度依赖性定位变化

• 发表时间: 2007
• 作者: 尾嶋 孝一;小野弥子;土井 菜穂子;吉岡 克英;川畑 順子;Labeit;S.;反町 洋之
• 通讯作者: 反町 洋之

カルパイン3異常症(カルパイノパチー)

钙蛋白酶 3 异常（钙蛋白酶病）

• 发表时间: 2008
• 期刊: Clinical Neuroscience 26
• 作者: K.Oiima;and H.Sorimachi.
• 通讯作者: and H.Sorimachi.

Suppressed disassembly of autolyzing p94/CAPN3 by N2A connectin/titin in a genetic reporter system

• DOI: 10.1074/jbc.m601029200
• 发表时间: 2006-07-07
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Ono, Yasuko;Torii, Fukuyo;Sorimachi, Hiroyuki
• 通讯作者: Sorimachi, Hiroyuki