权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

タンパク結晶の酸化還元反応に対する直接的電気化学検出法の開発

蛋白质晶体氧化还原反应直接电化学检测方法的发展

基本信息

批准号：
18750149
负责人：
小谷松大祐
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

タンパク質の構造を同定するための有力な手法の一つにX線結晶構造解析があるが,そのためにはタンパクを結晶化するための技術が必要不可欠となる.結晶化されたレドックス活性なタンパクを電気化学者の立場でみると,タンパク分子が高い配向性をもって極めて高密度に集合したデバイスであると言える.そこで,結晶化タンパクの酸化還元挙動を電気化学的に直接計測する手法を確立することができれば,極めて優れた特性を持つタンパクデバイスを作成するための足がかりになると考えられる.本研究では0.1〜1mm程度のレドックス活性タンパク結晶に適合したサイズの微小電極を作成し,電位を印加した際の酸化還元に伴う電流を観測した.その結果,血糖計などに広く用いられているグルコースオキシダーゼの結晶中に微小電極を接触させ,基質であるグルコースと電子メディエータのフェロセンメタノールを加えるとこれらが結晶内に拡散していき,タンパクが結晶状態を保った状態のままで酸化還元応答を示すことが確認された。また,電子移動タンパクの一種であるマビシアニンを用いて測定を行ったところ,分子が非常に高密度・高配向であるため,溶液中では不可能なマビシアニン-電極間の直接電子移動を観測することに成功した.さらに,銅タンパクの一種であるCuNiRに対して2-メチル-1,4-ベンゾキノンを電子メディエータに用いて電気化学・顕微分光の同時測定を行ったところ,電気化学的な酸化還元に伴って結晶の光吸収スペクトルが変化することが確かめられた.

タンパク之structuralを同定するための力な Techniqueの一つにるためのTechnology is necessary and indispensable for となる. Crystallization されたレドックスActive なタンパクをElectrochemical chemist's position でみると, タンパクmoleculesがHigh directional alignment をもってpole めてHigh density にassemble したデバイスであると语える.そこで, crystallization タンパクのacidification reduction element 挙动を电気The direct measurement method of chemistry is established.て优れたcharacteristicsをholdingつタンパクデバイスを成するための足がThis research is based on the active micro-electrode of 0.1~1mm level active electrolyte crystal.をmade, the potential is added, the acidification is reduced, the current is measured, the result is measured, the blood glucose meter is used, and the blood glucose meter is used.オキシダーゼのThe microelectrode in the crystal is in contact with the matrix. H&H electronics The るとこれらがに拡sanしていき, the タンパクがcrystalline state をったstate のままでacidification reduction 応Answer をshow すことがconfirm された.また, electron movement タンパクのa kind of であるマビシアニンをmeasured by いてを行ったところ, molecular がvery high density and high alignment であるため, では is impossible in solution なマビシアニン-Direct electron movement between electrodes をmeasurement することにsuccess した.さらに, copper タンパクのA kind of であるCuNiR に対して2-メチル-1,4-ベンゾキノンをelectronic メディエータにいて电気chemistry・镕microspectroscopy Simultaneous determination of を行ったところ, electrochemical なacidification reduction and って crystallization and light absorption スペクトルが剉化することが正かめられた.