軟骨石灰化におけるレプチンの役割

レプチンのシグナル伝達の関節軟骨の生理的石灰化、病的石灰化への関与を調べるために、我々は本年度の研究としてヒトOA軟骨を集め実験をすすめている。1.レプチンのOA軟骨細胞のPPi産生への影響。軟骨細胞培養系にレプチンを0.01-25μg添加し培養上清を摂取しePPiを測定。PPi産生は正常軟骨細胞と同様に、レプチンのdose-dependentに抑制される傾向を示した。但し有意差は個体によりバックグラウンドが高いため得られておらず更に個体数の蓄積が必要であると考える。また個体差是正への追加基礎実験としてOA軟骨細胞でのレプチンレセプター発現測定を試みている。2.レプチンの軟骨細胞小胞(ACV)石灰化に対する影響。OA軟骨においてはATP存在下・非存在下にかかわらず軟骨細胞の石灰沈着能が亢進しており、レプチン添加による影響は設定した生理的条件の添加量では不明確であった。レプチン添加により得られた石灰沈着物はFTIR分析予定である。3.石灰化軟骨においてのSTAT3発現。正常軟骨についてレプチンの軟骨細胞の対する作用について、STAT3を介した反応が軟骨細胞のレプチンへの反応を制御している可能性が示唆されたため、抗STAT3抗体を用い免疫染色にて石灰化軟骨でSTAT3が発現していることを確認した。((1)/2)についてはヒト軟骨細胞のviabilityの問題があり、未だ実験個体数が不足しており引きつづき検体収集を各方面に協力依頼している。)

レプチンのシグナル伝達の関節軟骨の生理的石灰化、病的石灰化への関与を調べるために、我々は本年度の研究としてヒトOA軟骨を集め実験をすすめている。1.レプチンのOA軟骨細胞のPPi産生への影響。軟骨細胞培養系にレプチンを0.01-25μg添加し培養上清を摂取しePPiを測定。PPi産生は正常軟骨細胞と同様に、レプチンのdose-dependentに抑制される傾向を示した。但し有意差は個体によりバックグラウンドが高いため得られておらず更に個体数の蓄積が必要であると考える。また個体差是正への追加基礎実験としてOA軟骨細胞でのレプチンレセプター発現測定を試みている。2.レプチンの軟骨細胞小胞(ACV)石灰化に対する影響。OA軟骨においてはATP存在下・非存在下にかかわらず軟骨細胞の石灰沈着能が亢進しており、レプチン添加による影響は設定した生理的条件の添加量では不明確であった。レプチン添加により得られた石灰沈着物はFTIR分析予定である。3.石灰化軟骨においてのSTAT3発現。正常軟骨についてレプチンの軟骨細胞の対する作用について、STAT3を介した反応が軟骨細胞のレプチンへの反応を制御している可能性が示唆されたため、抗STAT3抗体を用い免疫染色にて石灰化軟骨でSTAT3が発現していることを確認した。((1)/2)についてはヒト軟骨細胞のviabilityの問題があり、未だ実験個体数が不足しており引きつづき検体収集を各方面に協力依頼している。)