In vitro selection of novel recombinant antibodies

新型重组抗体的体外筛选

• 批准号: 19360377
• 负责人: DOI Nobuhide
• 金额: $ 11.56万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19360377/
• 关键词: 生物機能工学; 組み換え抗体; ライブラリー; 試験管内進化; 抗体医薬; 一本鎖抗体; Fab抗体; 試験管内選択; DNAディスプレイ法; RNAディスプレイ法; ライプラリー; 進化

mRNAディスプレイ(IVV)法を用いて、合成一本鎖抗体(scFv)ライブラリーから濃縮効率100万倍以上の高効率で、様々な抗原に結合するscFvや、on-rate選択およびoff-rate選択により親和性の向上したscFvを迅速かつ簡便に取得する手法を確立した。また、同様の手法を単一のドメイン抗体(ナノ抗体)の試験管内進化にも適用できた。次に、DNAディスプレイ(STABLE)法を用いて、二本鎖のFab抗体の試験管内選択に世界で初めて成功した。さらに、STABLE法のスクリーニング効率を上げるために、ビーズエマルジョンPCRとSTABLE法とを組み合わせた新しい手法を開発した。

MRNA デ ィ ス プ レ イ を (IVV) method with い て, synthetic antibody (scFv) a lock ラ イ ブ ラ リ ー か ら enrichment services rate of more than 1 million times の で high working rate, others 々 な antigen に combining す る scFv や, on - rate sentaku お よ び off - rate sentaku に よ り affinity の upward し た scFv を quickly か つ に Obtaining the する technique を establishes the た. Youdaoplaceholder0, the same method を単 - ドメ <s:1> <s:1> <s:1> antibody (ナノ antibody) <s:1> test tube evolution に に is applicable to で た た. Time に, DNA デ ィ ス プ レ イ method (STABLE) を with い て, 2 lock の の Fab antibody test tube sentaku に め the early で て success し た. さ ら に, STABLE の ス ク リ ー ニ ン グ sharper rate on を げ る た め に, ビ ー ズ エ マ ル ジ ョ ン PCR と STABLE method と を group み close わ せ た new し い gimmick を open 発 し た.

项目成果

Photocleavable linkage between genotype and phenotype for rapid and efficient recovery of nucleic acids encoding affinity-selected proteins

• DOI: 10.1016/j.jbiotec.2007.07.947
• 发表时间: 2007-09-15
• 期刊: JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
• 影响因子: 4.1
• 作者: Doi, Nobuhide;Takashima, Hideaki;Yanagawa, Hiroshi
• 通讯作者: Yanagawa, Hiroshi

ビーズエマルジョンPCRとSTABLE法の組み合わせによる受容体ペプチドリガンド探索手法の開発

结合珠乳液PCR和STABLE法开发受体肽配体检测方法

• 发表时间: 2008
• 作者: 丸岡優子;住田壮;山川奈津子;土居信英;柳川弘志
• 通讯作者: 柳川弘志

Rapid antibody selection by mRNA display on a microfluidic chip

• DOI: 10.1093/nar/gkp184
• 发表时间: 2009-05-01
• 期刊: NUCLEIC ACIDS RESEARCH
• 影响因子: 14.9
• 作者: Tabata, Noriko;Sakuma, Yuko;Yanagawa, Hiroshi
• 通讯作者: Yanagawa, Hiroshi

DNAディスプレイ法によるFab抗体の完全試験管内選択

利用DNA展示法完成Fab抗体的体外筛选

• 发表时间: 2008
• 作者: 住田壮;土居信英;柳川弘志
• 通讯作者: 柳川弘志

In vitro virus法を用いたヒト一本鎖抗体の試験管内選択

利用体外病毒法体外筛选人单链抗体

• 发表时间: 2007
• 作者: 小磯崇;福田伊佐央;鬼丸美智子;田畠典子;土居信英;高嶋秀昭;柳川弘志
• 通讯作者: 柳川弘志