Gene regulation of targeted cells and organelle by laser microinjection

激光显微注射对靶细胞和细胞器的基因调控

• 批准号: 19370017
• 负责人: HIGASHIYAMA Tetsuya
• 金额: $ 11.32万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19370017/
• 关键词: レーザーインジェクション; マイクロインジェクション; 植物細胞; モルフォリノアンチセンスオリゴ; 遺伝子発現制御; モルフォリノアンセチョセンスオリゴ; 植物培養細胞; 雌性配偶体; 花粉管ガイダンス; 遺伝子発現阻害; 抗体; 細胞; オルガネラ; 顕微操作

Here I aimed to control gene expression in targeted cells and organelle by using our laser injection method (Laser-assisted Thermal-expansion Microinjection ; LTM). I especially focused on down-regulation of targeted genes by using a unique plant Torenia fournieri, of which embryo sac is protruding from the ovule tissue. We succeeded in down-regulation of targeted genes by injecting morpholino antisense oligomers (MOs) into the protruding embryo sac. When we down-regulated LURE1 or LURE2 genes, which were candidates of pollen tube attractant genes specifically expressed in the synergid cell, pollen tube attraction was impaired. These results lead to identification of true attractant molecules LUREs. MOs were shown to be effective in plant cells as well as a protist Physarum polycephalum. Combination of laser injection with MOs was shown to be a powerful technique for down-regulation of eukaryotic cells.

在这里，我旨在通过使用激光注射方法（激光辅助热膨胀微注射； LTM）来控制靶​​细胞和细胞器中的基因表达。我特别专注于通过使用独特的植物多尼尼尼氏植物的靶基因下调，其中胚囊从胚珠组织伸出。我们通过将形态的反义寡聚物（MOS）注入突出的胚胎囊中，成功地下调了靶基因。当我们下调lure1或lure2基因时，这些基因是在协同细胞中特异性花粉管诱人基因的候选者时，花粉管的吸引力受损。这些结果导致鉴定真正的吸引剂分子诱饵。 MOS显示在植物细胞以及原生物理多头骨中有效。激光注射与MOS的组合被证明是对真核细胞下调的强大技术。

项目成果

New Protein Pmn34 with an Exonuclease Motif Localizes in the Mitochondrial Nucleoid Periphery of Physarum polycephalum

具有外切核酸酶基序的新蛋白 Pmn34 定位于多头绒泡菌的线粒体核素外围

• 发表时间: 2009
• 期刊: Cytologia 74
• 作者: 華岡光正;加藤麻衣子;東美由紀;田中寛;Kie Itoh
• 通讯作者: Kie Itoh

レーザーマイクロインジェクション法を用いた花粉管誘引物質LUREsの解析

激光显微注射法分析花粉管引诱剂 LURE

• 发表时间: 2009
• 作者: 筒井大貴;他3名
• 通讯作者: 他3名

花粉管誘引物質LUREsの受容体タンパク質の探索

寻找花粉管引诱剂受体蛋白 LURE

• 发表时间: 2009
• 作者: 奥田哲弘;他3名
• 通讯作者: 他3名

「植物受精の瞬間を捉える」

“捕捉植物受精的瞬间”

• 发表时间: 2007
• 作者: Inoue;et. al.;東山 哲也
• 通讯作者: 東山 哲也

花のなかでの受精と細胞間シグナリング

花中的受精和细胞间信号传导

• 发表时间: 2008
• 期刊: 蛋白質核酸酵素 53巻
• 作者: Okuda S;et al.;宮竹貴久;東山哲也
• 通讯作者: 東山哲也