Solid-state NMR analysis of membrane protein complexes with 7-transmembrane helices

具有 7 次跨膜螺旋的膜蛋白复合物的固态 NMR 分析

• 批准号: 19370068
• 负责人: FUJIWARA Toshimichi
• 金额: $ 11.73万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19370068/
• 关键词: 構造生物学; 生物物理; 蛋白質; 原子・分子物理; ナノバイオ; 生体分子; 核磁気共鳴; 膜蛋白質; 蛋白質立体構造; 固体NMR

Solid-state NMR enables the structural determination of biological molecular complexes in unoriented solids. We verified the usefulness of magic-angle spinning solid-state NMR based on dipolar and J couplings for the structural analysis of ^<13>C uniformly labeled biomolecular complexes. We applied solid-state NMR to halorhodopshin, mastoparan-X and 159-redisue transducer protein pHtrII in lipid bilayers. Solid-state NMR provided the detailed structure of mastoparan-X with membranes by combining NMR constraints with replica exchange molecular dynamics simulation using implicit membrane environment. This method was applied to NMR analysis of larger membrane proteins. ^1H-^<13>C correlations of mobile segments of pHtrII were analyzed.

固体核磁共振使生物分子复合物的结构确定在未定向的固体。我们验证了基于偶极和J耦合的魔角旋转固态NMR对于^<13>C均匀标记的生物分子复合物的结构分析的有用性。我们应用固态核磁共振技术对脂双层中的halorhodopshin、mastoparan-X和159-redisue转导蛋白pHtrII进行了研究。固态NMR提供了详细的结构mastoparan-X与膜相结合的NMR约束与复制交换分子动力学模拟使用隐式膜环境。该方法被应用于较大的膜蛋白的NMR分析。分析<13>了pHtrII的移动的片段的^1H-^ C相关性。

项目成果

高磁場DNPと固体NMR生体分子複合体構造解析

高场 DNP 和固态 NMR 生物分子复杂结构分析

• 发表时间: 2008
• 作者: Suh P. G.;et al.;藤原敏道
• 通讯作者: 藤原敏道

Structural Analysis of Pituitary Adenylate Cyclase-Activating Polypeptides Bound to Phospholipid Membranes by Magic Angle Spinning Solid-State NMR

通过魔角旋转固态核磁共振对与磷脂膜结合的垂体腺苷酸环化酶激活多肽进行结构分析

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biochim.Biophys.Acta 1768
• 作者: N.;Komi
• 通讯作者: Komi

1H-Detected 1H-1H Correlation Spectroscopy of a Stereo-Array Isotope Labeled Amino Acid under Fast Magic-Angle Spinning

快速魔角旋转下立体阵列同位素标记氨基酸的 1H 检测 1H-1H 相关光谱

• 发表时间: 2010
• 期刊: J. Magn. Reson 203
• 作者: Hiroki Takahashi;Masatsune Kainosho;Hideo Akutsu;Toshimichi Fujiwara
• 通讯作者: Toshimichi Fujiwara

膜タンパク質ハロロドプシンの多次元固体NMR法による構造解析

利用多维固态核磁共振方法分析膜蛋白盐视紫红质的结构

• 发表时间: 2009
• 作者: 樋口真理花;江川文子;田巻初;神谷昌克;相沢智康;河野敬一;藤原敏道;出村誠
• 通讯作者: 出村誠

Solid-State NMR Analysis of Membrane Protein and High-Field DNP

膜蛋白和高场 DNP 的固态 NMR 分析

• 发表时间: 2009
• 作者: Ichinohe;M.;Hirata;M.;Takenawa;T.;Nakamura;Y.,Fukami;K.;藤原敏道
• 通讯作者: 藤原敏道