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RhoGTPasesの下流蛋白質DIP/WISHのノックアウトマウスの解析

基因敲除小鼠 DIP/WISH（RhoGTPases 下游蛋白）的分析

基本信息

批准号：
19590294
负责人：
福見知子
金额：
$ 3万
依托单位：
National Institute for Physiological Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19590294/
关键词：
細胞・組織蛋白質脳・神経シグナル伝達細胞骨格

项目摘要

研究者が2001年に見いだしたDIP/WISHは、低分子量G蛋白質Rhoの下流蛋白質mDiaと(N-)WASPに結合するadaptor proteinである。この遺伝子改変動物(ノックアウトマウス)を作製したので、細胞骨格再編成(actin polymerization, Arp2/3 activation,microtubule assembly)に関わる細胞機能およびそれに伴って起こると期待される器官形成について詳細な検討を加える。ノックアウトマウスと野生型マウスからMEF(mouse embryonic fibroblast)を採取し、これを用いてtime-lapse法を用いたmigration assay、wound heahng assayを行い、細胞運動能を比較検討した。まず、MEFのphenotypeがノックアウトマウス由来のものではstress fiberの増強が見られ、細胞運動能ではノックアウトマウス由来のMEFは新たな細胞接着斑の形成に乏しく、運動能も低下していることが判った。また、細胞接着能を検討したところ、これにおいてもノックアウトマウス由来のMEFのcell spreadingが遅延、未熟であることが判った。生化学的な検討より、これらの現象に伴い、マウス由来のMEFにおけるRhoのactivityが刺激前から増加していることが判った。この結果は、研究者が2004年に報告した結果(DIPはRhoを不活性化する)と一致するものであった。現在さらに、MEFを用い、proliferation,apotosis等を検討中である。さらに、DIP/WISHの発現の多い、中枢神経系において、形態や行動実験を検討中である。

The researchers found that DIP/WISH protein, low molecular weight G protein Rho and downstream protein mDia (N-)WASP bind to adaptor protein. The detailed discussion on cell function and organogenesis related to actin polymerization, Arp2/3 activation,microtubule assembly in the control of this genetic modification animal ($>$>$>). MEF(mouse embryonic fibroblast) was used to compare cell motility with migration assay, wound heahng assay and time-lapse method. MEF phenotypeÂ ® Â ®The cell spreading of MEF is delayed and immature. Biochemistry: The activity of Rho increases before stimulation. The results were consistent with those reported by the researchers in 2004 (DIP Rho inactivation). Now, MEF, proliferation,apotosis, etc. are discussed. In addition, many DIP/WISH discoveries, changes in the central nervous system, and changes in form and action can be seen in the discussion.