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Characterization of Neutralizing Epitopes Varicella-Zoster Virus Glycoprotein G

水痘带状疱疹病毒糖蛋白 G 中和表位的表征

基本信息

批准号：
19590470
负责人：
DAIKOKU Tohru
金额：
$ 2.91万
依托单位：
University of Toyama
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19590470/
关键词：
ウイルス VZV glycoprotein gH glycoprotein H

项目摘要

抗gH抗体カラムにVZV感染細胞抽出液をアプライ後溶出し、抗gH抗体と反応性のある蛋白質を精製した。この精製画分からgHアフィニティカラムを作成した。VZV感染HEL細胞の抽出液をアプライし溶出を精製を試みた。9種類の抗体の内、3種類は相互にavi-tag抗体の結合がブロックされた。他のクローンはホモでのみブロックがかかり、ヘテロではブロックされなかった。また、いずれの抗体の組み合わせも中和活性に関して相乗的に作用するものは認めず、相加的または阻害的に作用した。上記の結果より、4つのクローンのエピトープは極めて接近していると考えられる。他の5つのクローンはホモでのみにブロックがかかり、ヘテロではブロックされなかったことから、これらの抗体の認識エピトープは異なる事が示された。水痘帯状ウイルスのgHの中和の標的domainは1カ所で、少なくとも5カ所のエピトープより構成されていることが予想された。VZV感染後に抗gHヒト型モノクローナル抗体を培地中に添加することにより、約1週間で感染性が消失することが明らかとなった。抗体存在下ではVZV特有の細胞変性も、感染細胞数の増加も認めなかった。VZV-HBs感染28日後にVZV野生株を感染させ、一旦ウイルスを増殖させた後、cell-free virusをHEL上に重層したところ、アシクロビル存在下でVZV-HBsによるプラーク形成が認められた。このことはVZV-HBsが潜伏感染していたことを示唆する。感染細胞を抗gH中和抗体で処理することにより、やがて感染性は完全に消失し、種々の刺激でも容易に復帰しない状態へと移行した。これは潜伏感染に類似した状態であることが示唆された。それゆえ、抗gH抗体は水痘および帯状疱疹の予防・治療に極めて有用であるといえる。

The anti-gH antibody was infected by VZV, the cell extract was dissolved after the infection, and the anti-gH antibody was reversed by protein. The fine picture is divided into two parts: gH, draw, draw. The extract of VZV infected with HEL cells was used to dissolve spermatozoa. The avi-tag antibodies of class 9 and type 3 were combined with each other. He told me that she didn't know what to do, and that she didn't know what to do. The combination of antigens and antibodies neutralizes the action of active antigens, the action of antigens, and the blocking effect of added antigens. The results of the previous report show that you are close to the results of the previous test. He