相同組換え開始時における染色体タンパク質ヒストンの機能

染色体蛋白组蛋白在同源重组起始过程中的功能

• 批准号: 19870004
• 负责人: 山田 貴富
• 金额: $ 2万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19870004/
• 关键词: 相同組換え; ヒストン; 染色体構造; 減数分裂; クロマチン

遺伝情報を適切に維持するために重要な反応である相同組換えが生体内においてどのようにおこっているかを明らかにすることが目的である。この際、DNAと強固に結合して転写や修復等の諸反応を制御するヒストンタンパク質に注目している。本計画ではヒストンの翻訳後修飾が転写や修復に重要であることをふまえ、ヒストン修飾状態やヒストン修飾酵素と相同組換え反応との関係に焦点を当てる。実験系として、相同組換えが活性化される分裂酵母の減数分裂期細胞を用いている。今年度の成果、進行状況は次の通りである。(1)ヒストン修飾状態の解明既知の組換え頻発部位のヒストン修飾状態を解明するため、各種修飾ヒストンに対する抗体を用いたクロマチン免疫沈降の実験条件を検討した。これに加え、次の実験系を導入した。塩基配列特異的DNA結合モジュールGal4BDの認識配列を染色体中に導入したところ、その周辺で組換えが頻発することがわかった(Gal4BD associated recombination hotspot;G4RHと呼ぶ)。そこでGal4BDをヒストンメチル化酵素Clr4、ヒストン脱アセチル化酵素Clr6に融合させ、それらのヒストン修飾酵素をG4RHに局在させる系を構築した。同部位でのヒストン修飾状態、組換え率を現在検定中である。(2)ヒストン修飾酵素の組換えにおける役割の解明ヒストンメチル化酵素であるClr4、Set2、Set9等の遺伝子破壊体を作製し、それらの減数分裂期での表現型を解析した。その結果、Clr4、Set9については減数分裂の進行に異常が認められることがわかった。現在、この異常と相同組換えの関連について調べている。また、Set2の遺伝子破壊体の表現型を解析している。

The information on the deceased is appropriate and important, and it is important to maintain it. It is necessary to react in the same way and replace it in the body.においてどのようにおこっているかを明らかにすることがpurposeである. There are various countermeasures, such as DNA, strong combination, repair and so on. This project has been revised and rewritten after the translation, and it is important that the project be rewritten and repaired.ストン modification status やヒストン modification enzyme と same group replacement え 応 と の relationship に focus を て る. The same group of として and えがactivated される fission yeast cells in the meiotic stage are used. This year's achievements and progress are summarized. (1) のヒストン Modification status を clarification するため、Various modified ヒストンに対する antibodies are used for immunoprecipitation using いたクロマチン and the conditions are を検した.これに加え、时の実験式を Import した. Gal4BD, a DNA-binding enzyme specific to the base array, recognizes the array in the chromosome. Import したところ, そのweek辺でchange えがfrequency発することがわかった(Gal4BD associated recombination hotspot;G4RHとHUぶ).そこでGal4BD をヒストンメチchemical enzyme Clr4, ヒストンアセチルchemical enzyme C lr6 is a fusion of させ, それらのヒストン modification enzyme をG4RH にbureau is built in させる system した. The modification status of the same parts and the rate of group replacement are now fixed. (2) ヒストン-modifying enzyme の group replacement えにおける伊恮解明 ヒストンメチル化zyme であるClr4, Set2, Set9, etc. can be used to analyze the phenotype of the meiosis phase and the production of the remaining parts of Set2 and Set9. The result of その, Clr4, Set9 については meiosis の progress に abnormal が cognize め ら れ る こ と が わ か っ た. Now, the same combination of abnormality and relatedness is replaced by the same combination.また、Set2の伝子波壊体のphenotypeをANALYSISしている.

项目成果

Molecular characterization of the role of the Schizosaccharomyces pombe nip1+/ctp1+ gene in DNA double strand break repair in association with the Mre11-Rad50-Nbs1 complex

粟酒裂殖酵母 nip1 /ctp1 基因在 DNA 双链断裂修复中与 Mre11-Rad50-Nbs1 复合物相关的作用的分子表征

• 发表时间: 2008
• 期刊: Molecular and Cellular Biology vol.28
• 作者: ufuko Akamatsu;Yasuto Murayama;Takatomi Yamada;Tomofumi Nakazaki;Yasuhiro Tsutsui;Kunihiro Ohta;Hiroshi Iwasaki
• 通讯作者: Hiroshi Iwasaki

Modulation of immunoglobulin gene conversion in chicken DT40 by enhancing histone acetylation and its application to antibody engineering

增强组蛋白乙酰化调节鸡DT40免疫球蛋白基因转化及其在抗体工程中的应用

• 发表时间: 2007
• 作者: Seo H.;Yamada T.;Hashimoto S.;Lin W.;and Ohta K.
• 通讯作者: and Ohta K.