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アブラナ科自家不和合性分子ネットワークに関する遺伝学的・分子生物学的解析

十字花科自交不亲和性分子网络的遗传与分子生物学分析

基本信息

批准号：
19880004
负责人：
諏訪部圭太
金额：
$ 1.77万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

アブラナ科自家不和合性における認識反応以降の分子メカニズムを明らかにすることを目標に、Brassica rapa自家和合性突然変異体での遺伝解析とモデル植物シロイヌナズナ(自家和合性)での自家不和合性形質転換体の作出を試みた。1.B. rapaに関する研究B. rapa自家和合性突然変異体5系統と自家不和合性系統の交配より作出したF_1を育成し、各交配系統約100粒のF_2種子を獲得した。採種後、各後代F_2集団より20個体を任意選抜し、温室内で栽培し自家不和合性表現型を決定した。遺伝子型については、B. rapa連鎖地図に座上する113個のSSRマーカーの多型を各両親間で調査し、約80個の多型を有するSSRマーカーを選抜した。これらSSRマーカーについて、後代F_2集団での各遺伝子座の遺伝子型をPCR法によって決定した。2.シロイヌナズナに関する研究3種の異なるエコタイプ(#1、#2、Col-0)より自家不和合性雄蕊認識因子SP11/SCRをPCR法により単離し、その塩基配列を解読した。その結果、C末端側領域にすべてのエコタイプに共通する変異を見出した。また、エコタイプ#1、#2ではN末端領域に5bpの欠失、Col-0では変異境界領域に13bpの重複が存在することを見出した。これら変異をPCR法によって修復し、正常復元型SP11を構築した。タペート細胞特異的プロモーターと共に形質転換用ベクターに連結し、エコタイプ#1、#2に遺伝子導入した。各エコタイプよりT_0種子を獲得し、現在、植物体の育成中である。

The analysis of the genetic changes of the plant's incompatibility with its own characteristics is carried out in order to understand the molecular structure of the plant's incompatibility. 1.B. rapa study B. Rapa hybrid hybrid After harvesting, 20 individuals from each F_2 population were selected randomly, and their phenotypes were determined in greenhouse. The genetic type is, B. There are 113 SSR markers in the locus of rapa linkage, and about 80 SSR markers in the locus of rapa linkage. The PCR method was used to determine the genetic types of SSR loci and F_2 loci. 2. To study the relationship between three kinds of heterosis (#1,#2, Col-0), heterosis and stamen recognition factor SP11/SCR. The result is that there is no difference between the two. 5bp deletion in N-terminal domain, 13bp duplication in Col-0 domain Construction of normal complex SP11 by PCR Select cell-specific options and switch between options for link #1 and #2 for gene introduction. The seed of each plant is obtained, and the plant is cultivated.