权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Analysis of functional small RNAs in male and female blastocysts

雄性和雌性囊胚中功能性小RNA的分析

基本信息

批准号：
19770004
负责人：
KOBAYASHI Shin
金额：
$ 2.46万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University (2008)Osaka University (2007)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19770004/
关键词：
small RNA 性分化 smalIRNA 胚盤胞

项目摘要

哺乳類の遺伝学的な性(雄はXY, 雌はXX)は受精時に決まり、ついでSryの発現が引き金となって生殖腺の性が決まり、生殖腺からの性ホルモンが全身に作用して雌雄に様々なちがいを引き起こすといわれている。しかし着床前に雄は雌より早く成長するという報告があり、この時期から雌雄が性分化をしている可能性が高い。そこで「雌雄の発生がいつから異なるのか?」というテーマに取り組むため発生初期の雌雄の胚を比較してきた。我々のこれまでの研究では、DNAマイクロアレイの解析により従来考えられていたより早い胚盤胞期から既に雌雄の遺伝子発現が異なっていることを明らかにしている。一方、近年、small RNAと呼ばれる低分子のRNAが見つかってきており、これらは哺乳類の発生において重要な機能を持ち、正常な個体発生に必須の分子であることがわかってきた。我々は雌雄の発生を分子生物学的に比べるには既知遺伝子だけではなく、small RNAの比較解析も必須であると考えた。そこで雌雄間で発現の異なるsmall RNA分子を探索を行うために、まず胚盤胞におけるsmall RNA libraryの作製を行なうことにした。胚盤胞は微量のサンプルであるため、PCRによるサンプルの増幅などの工夫を凝らすことにより、雌雄の胚盤胞各1000個からオリジナルのクローン数が多い良質のライブラリーを作製することに成功した。次に、このライブラリーについて大規模シーケンスを行い、雌雄それぞれ30万以上のsmall RNAの配列決定に成功している。現在、両者の配列を比較し雌雄間で発現の差を示す候補small RNAを複数同定している。これにより着床前の雌雄胚で発現に差があるsmall RNAのデータという着床前における雌雄の発生を理解する上で非常に貴重な情報が得られたと考えられる。

Mammalian genetic sex (male XY, female XX) is determined during fertilization, and the development of Sry leads to the development of gonad sex determination, gonad sex determination, and whole body action. The possibility of male and female differentiation before implantation is high.そこで“雌雄の発生がいつから异なるのか?”A comparison of male and female embryos in the early stages of development In this study, we analyzed the differences in DNA expression between male and female embryos in early blastoderm stages. In recent years, small RNA and low molecular RNA have been found to be important for mammalian development and essential for normal individual development. The comparative analysis of male and female genes in molecular biology is necessary. The discovery of small RNA molecules between males and females is a major step in the development of small RNA libraries. The number of blastoderm cells was increased by 1000 per sex, and the number of blastoderm cells was increased by 1000 per sex. In addition, the large-scale RNA sequencing was successfully conducted in both sexes, with more than 300,000 small RNA sequencing decisions. Now, the alignment of small RNA is different between males and females, and the number of small RNA candidates is different. The difference between male and female embryos before implantation is very valuable.