リバースジェネティクス技術を用いたエボラウイルスの病原性発現の分子基盤の解明

利用反向遗传学技术阐明埃博拉病毒致病性的分子基础

• 批准号: 19790334
• 负责人: 海老原 秀喜
• 金额: $ 2.35万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19790334/
• 关键词: 病原性; 高病原性病原体

申請者は、リバースジェネティクス法(人工的にウイルスを作成する技術)等の分子生物学的技術と動物実験を駆使し、ヒトに重篤な出血熱を惹起するエボラウイルス(EBOV)のうち強毒ザイールEBOV (ZEBOV) と近縁のマールブルグウイルス(MARV)、出血熱を惹起しないレストンEBOV (REBOV)の3種類のウイルスタンパク質(GP, VP35, VP24)の病原性に関わる機能(主に免疫御能等)を比較し、EBOVタンパク質の病原性発現における役割に焦点を絞って研究を実施する。本年度(平成20年度)は、以下の研究を遂行した。(1) 新たなエボラ出血熱の動物モデルの確立 : ゴールデンハムスターを用いたエボラウイルス感染モデルを開発した。このモデルはヒトと同様の病態を示すことから、今課題の病原性の研究のみならずワクチン・治療法の開発にも有用なモデルになる事が期待される。(2) フィロウイルスの糖タンパク質を発現する組換え水泡性口内炎ウイルス(VSV)ライブラリーの構築 : 現存する5種類のエボラウイルス糖タンパク質及び5種類のマールブルグウイルス株の糖タンパク質を発現するVSVを作成した。このシステムを確立したことにより、フィロウイルスの糖タンパク質による免疫抑制能の研究をヒトの初代培養細胞系を用いて遂行可能となった。(3) 強毒型マールブルグウイルス・アンゴラ株のモルモットモデルの確立とリバースジェネティクス法の確立 : 2005年に致死率90%以上の流行を起こしたアンゴラ株のモルモットモデルを確立し、さらにリバースジェネティクス法の確立を実施中である。(4) さらにエボラウイルスのVP35及びVP24のインターフェロンシグナリング能の比較を行った。

Applicants are required to submit their applications in accordance with the law. The molecular biology technology such as artificial virus production technology and animal disease control technology, severe hemorrhagic fever (EBOV), severe hemorrhagic fever (MARV), severe hemorrhagic fever (REBOV) and other three types of virus production technology (GP, VP35, VP24), and carry out research on pathogenic development of EBOV. This year (2010), the following research was carried out. (1)The new animal model of hemorrhagic fever was established by using the model of infection. The research on pathogenicity of the disease and the development of therapeutic methods are expected. (2)VSV construction: There are 5 kinds of VSV construction in existence and 5 kinds of VSV construction in existence. The study of immunosuppressive activity in primary cultured cell lines was carried out in vitro. (3)The establishment of the method of production of virulent virus strains: the establishment of the method of production of virulent virus strains: the establishment of the method of production of virulent virus strains: the establishment of the method of production of virulent virus strains: the establishment of the method of production of virulent virus strains in 2005. (4)In addition, the comparison of VP35 and VP24 in the development of the software is also carried out.

项目成果

In vitro and in vivo characterization of recombinant Ebola viruses expressing enhanced green fluorescent protein

• DOI: 10.1086/520590
• 发表时间: 2007-11-15
• 期刊: JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES
• 影响因子: 6.4
• 作者: Ebihara, Hideki;Theriault, Steven;Feldmann, Heinz
• 通讯作者: Feldmann, Heinz